Liste des posters 2022
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►Les pdf des posters seront disponibles au téléchargement sur cette plateforme post-congrès. Le dépôt de ces fichiers autorise par défaut leur mise en ligne.
► Les posters seront exposés pendant toute la durée du congrès du mercredi 9 novembre 10h00 au vendredi 11 novembre 13h00. 
Les posters non récupérés seront détruits et, par conséquent, aucun poster ne sera renvoyé.

► Les auteurs présentateurs devront se tenir devant leur poster pendant les pauses afin de répondre aux éventuelles questions des participants.

► Afin de faciliter la lecture de votre poster, nous vous conseillons les dimensions suivantes : 100 à 110 cm de haut - 80 à 90 cm de large (format portrait - format utile d'affichage : Haut. 239 cm - Larg. 94 cm).
► Le matériel de fixation sera fourni sur place (pastilles velcros).

Introduction : Un tiers des patients (pts) atteints d’hémopathies malignes nécessitant potentiellement une allogreffe ne dispose pas de donneur HLA géno-identique. Cette dernière décennie a vu l’avènement de la procédure d’allogreffe de CSH à partir d’un donneur haplo-identique qui permet de la réaliser chez tous les pts. Nous proposons les résultats d’une étude rétrospective sur 32 pts qui ont bénéficié de cette procédure. 
Matériel et Méthodes : De mai 2013 à décembre 2021, 35 allogreffes myéloablatives haplo-identiques ont été réalisées chez 33 pts atteints de  LAM d’âge médian 27 ans (4-60) et un sex-ratio (M/F) de 1,4. Le délai diagnostic-greffe et de 23 mois (4-66). A la greffe, 30 pts étaient en deuxième rémission complète et 3 en 1ère RC. L’âge médian des donneurs est de 38 ans (6 -65). Le degré de compatibilité (HLA A, B et DR) est de 3/6 (23 cas), 4/6 (8 cas) et 5/6 (2 cas). Le statut CMV entre donneur/receveur a été à haut risque dans 31 cas. L’incompatibilité ABO est majeure dans 4 cas, mineure dans 10 cas. Deux procédures ont été utilisées successivement dans le temps : La première pour 8 pts avec un conditionnement qui a associé Busilvex 9,6 mg/kg, Aracytine 8 g/m2, Endoxan 3,6 g/m2 ; une prévention de la GVHD qui a comporté l’association Ciclosporine-Méthotrexate, MMF et SAL 10 mg/kg et un greffon  associant moelle osseuse (après sensibilisation par G-CSF) avec un taux moyen de cellules nucléées: 4,89.108/kg (0,58-7,44) et cellules souches périphériques (à partir d’un donneur ayant reçu au préalable du G-CSF à la dose de 5µg/kg) . Vingt cinq pts ont bénéficié de la 2ème procédure associant Thiothepa 10 mg/kg, Fludarabine 150 mg/m2 et Busilvex 3,2 mg/kg avec une prophylaxie de la GVHD comportant Ciclosporine, MMF et Endoxan (100 mg/kg) post greffe avec un taux moyen de cellules CD34+ : 6,84.106/kg (3,05-8,97) et CMN : 5,4A5.108/kg (1,59-10,25). La prophylaxie anti-infectieuse a consisté en l’association du Bactrim, Fluconazole, Aciclovir et Ciprofloxacine chez l’adulte.
Résultats : Tous les pts ont présenté une aplasie, la sortie d’aplasie est observée  en moyenne à J13 (12-28). Un cas de MVO sévère a été observé à  j17. Trois pts ont présenté un rejet précoce dont 2 ont bénéficié d’une deuxième greffe haplo-identique à partir d’un deuxième donneur. Sept cas (26%) de cystite hémorragique (5 dans le bras TBF) sont observés en moyenne à J54 (24-118). Une GVH aiguë est survenue chez 10 pts (38%)  de grade II-IV dans un délai moyen de 26 jours (17-100) et une GVH chronique chez 7 pts (41%) de forme extensive chez 5 pts. Treize pts (50%) ont présenté une réactivation CMV survenue en moyenne à J’43 (19-67). Une rechute est survenue chez   5  pts , dont un  a été remis en rémission complète après DLI. . En juin 2022, 11 pts (33%) sont vivants après un suivi médian de 55 mois (6-108) et 22 pts (67%) sont décédés (GVH aigue : 4 ,infection sévère : 8 dont 6 précoces, MVO: 1 ,rejet :2 , rechute :4 , arrêt cardiaque : 3 ) avec une TRM à 54%. Les survies actuarielles globales et sans événements sont respectivement de 32% et 26% à 108 mois.  
Conclusion : L’allogreffe de CSH haplo-identique dans les LAM reste une alternative thérapeutique maintenant validée chez les pts avec un stade avancé de la maladie comme l’atteste les résultats de cette série. Néanmoins, des progrès sont nécessaires afin de réduire le taux de TRM relativement élevé.  

Introduction: Les lymphomes diffus à grandes cellules B (LDGCB) sont les plus fréquents des LNH (40%), agressifs mais chimio sensibles. La thérapeutique actuelle recourt à une immunochimiothérapie associant le Rituximab et une poly-chimiothérapie. L’allogreffe de cellules souches hématopoïétiques (CSH) reste une option thérapeutique notamment chez les patients en rechute ou réfractaires. Nous rapportons les résultats à long terme d'une série de 14 patients (pts) ayant bénéficié de cette procédure dans notre centre.
Matériel et Méthodes: De Septembre 2002 à Avril 2011, une allogreffe de CSH géno-identique a été réalisée chez 14 patients présentant un LDGCB. L’âge médian est de 29 ans (17 à 54). Le sex-ratio (H/F) est de 1. L'index pronostic international (IPI) est: intermédiaire faible (6 pts), intermédiaire élevé (5 pts), élevé (3 pts). Le délai moyen diagnostic-greffe est de 18,8 mois (5,5 à 84). Tous les pts ont été traités par au moins 2 lignes thérapeutiques et 3 seulement ont bénéficié préalablement d’une autogreffe. Le statut avant greffe est le suivant : rémission complète (10 pts), incomplète (3 pts) et en progression (un patient). Le conditionnement de type RIC a associé Fludarabine-Melphalan (4 pts), et de type MAC associant Busulfan-Aracytine-Melphalan (8 pts) et Busulfan-Endoxan (2 pts). La prophylaxie de la GVHD était composée de Ciclosporine-Methotrexate (MAC) ou Ciclosporine-Cellcept (RIC). Tous les pts ont reçu des cellules souches périphériques avec un taux moyen de cellules CD34+ : 7,9.106/kg (3,2-13,6).
Résultats: L’aplasie a été constatée chez tous les pts, de durée moyenne 12 jours (8-17). Le délai médian de la sortie d’aplasie est à J12 (6-16). Aucun cas de MVO n’a été constaté. Une GVH aiguë a été observée chez 6 pts (42,8%) dont 5 de grade II–IV. Sept pts ont présenté une GVH chronique dont 4 de forme extensive. Deux pts ont eu une réactivation CMV après un délai médian de 45 jours (41-51). La rechute est survenue chez 2 pts (14,2%) après 4 et 72 mois de suivi. Après un suivi médian de 15 ans (11-20), 5 pts (36%) sont vivants sans maladie et 9 pts (64%) sont décédés dont 07 (50%) de TRM (GVHD :3, infection précoce :01, embolie pulmonaire :1) et 2 de rechute. Les survies actuarielles globale et sans événements sont de 35.7% respectivement.
Conclusion: L’allogreffe de CSH reste effectivement une option thérapeutique intéressante chez les pts atteints de LDGCB réfractaires ou en rechute, comme le montre cette étude avec un suivi à très long terme, malgré une TRM élevée probablement due à l’inclusion de pts lourdement traités préalablement.

Introduction : L’allogreffe reste une alternative thérapeutique curative dans les LAM, en raison du risque élevé de rechute après chimiothérapie standard. L’intérêt majeur des conditionnements à intensité réduite (RIC) ou à toxicité réduite (RTC) est de réduire la mortalité liée à la greffe en diminuant les complications précoces et d’exploiter l’effet allogénique graft-versus leukemia. Nous rapportons les résultats sur une série de 615 patients (pts) atteints de LAM ayant bénéficié d’une allogreffe avec un RTC dans 2 centres en Algérie.
 
Patients et Méthodes : il s’agit d’une étude rétrospective intéressant 615 pts atteints de LAM (CPMC : 551 pts ; EHU Oran : 64 pts), qui ont bénéficié d’une allogreffe de CSH avec un conditionnement à toxicité réduite entre Février 2008 et Mai 2021 (13 ans) à partir d’un donneur familial HLA géno-identique. L’âge médian est de 38 ans (16 -64) et le sex-ratio de 1,41 (360 H/255 F), le statut prégreffe : 543 pts en 1ère rémission complète (RC), 55 pts en 2ème RC et 17 pts en poussée blastique. Le conditionnement à la greffe comportait l’association Fludarabine 160 à 200mg/m², Busilvex 12,8mg/kg avec ou sans sérum anti lymphocytaire (Thymoglobuline ; Genzyme) 5mg/kg. La prévention de la réaction du greffon contre l’hôte (GVH) a associé Ciclosporine jusqu’à J100 en absence de GVH et Méthotrexate selon le protocole Seattle. Le greffon de cellules souches périphériques a été utilisé chez tous les pts avec un taux moyen de cellules CD34+ : 7 x10⁶/kg (0,89 -22). Au 01 Juin 2022, le recul maximum est de 170 mois et minimum de 12 mois.
 
Résultats : l’aplasie est constatée chez tous les pts d’une durée moyenne de 11 jours (2-28). La sortie d’aplasie est observée en moyenne à J14 (7-45). Deux cent vingt pts (36%) ont nécessité une transfusion de culots globulaires (CG) avec une moyenne de 2,5 CG/Pt (1-12) et 497 pts (81%) de concentrés plaquettaires avec une moyenne de 1,8 CUP/pt (1-9). Quatre cent soixante-cinq pts (75,6%) ont présenté une mucite de grade III-IV et 13 pts (2 %) ont présenté une MVO. Une GVH aiguë est survenue chez 130/602 pts (21,5%)[FLU-BU : 39 pts (19,8%) vs FLU-BU-SAL : 54 pts (13,3%). p : 0,04]. Une GVH chronique est observée chez 186/571 pts (32,5%) [FLU-BU : 95 pts (51,9%) vs FLU-BU-SAL : 91 pts (23,4%) ; p : 0,001]. Une rechute est observée chez 165 pts (27,4%), après un délai moyen de 10 mois (2-89). Au 01 Juin 2022, 348 pts sont vivants (56,6 %), avec une médiane de suivi de 77 mois (12-170). Deux cent soixante-sept pts sont décédés (43,4 %) dont 122 pts liés à la procédure (TRM : 19,8% hémorragie cérébro-méningée : 4 ; MVO : 6 ; infection : 52; GVH aiguë : 31 ; GVH chronique : 18, AVC ischémique : 2 ; choc cardiogénique : 1, OAP lésionnel : 1 ; MAT : 2, syndrome de fuite capillaire : 1 ; PTLD : 1, mort subite : 3) et 145 pts (23,5%) de rechute. La survie actuarielle globale et la survie sans événements sont de 54,1% et 54,5% respectivement par contre la GRFS est de 52,1% (FLU-BU : 38,3 % vs FLU-BU-SAL : 58% ; p : 0,0001).
 
Conclusion : Les résultats de l’allogreffe avec un RTC semblent satisfaisants en termes de tolérance, taux de SG et SSE, avec une TRM acceptable. Le taux de rechute relativement important rejoint celui de la littérature par contre le taux de GVH a nettement diminué avec l’utilisation du sérum anti lymphocytaire à 5 mg/kg dans le conditionnement.

Introduction / Objectif

L'Agence de la biomédecine (ABM) souhaite utiliser les bases médico-administratives afin de compléter sa mission de biovigilance et pallier à la sous-déclaration des effets indésirables liés aux activités de prélèvement et greffe de cellules souches hématopoïétiques (CSH). Ce travail exploratoire a pour objectif d'identifier dans le système national des données de santé (SNDS) les séjours hospitaliers pour allogreffe de CSH et certaines complications survenues au cours de l'hospitalisation initiale, comme le syndrome d'obstruction sinusoïdale (SOS), le choc cardiogénique, la microangiopathie thrombotique (MAT), la cystite hémorragique (CH) et le passage en réanimation.
 
Matériel & Méthode

Le GHM 27Z02 (Allogreffe de CSH) a été utilisé pour identifier les séjours entre 2015 et 2020. Seuls les séjours pour les adultes ≥18 ans et avec une durée ≥ 5j ont été conservés.
Le SOS a été identifié via le code CIM10 K765 en diagnostic associé (DAS) ou l'acte CCAM HLHH005 (Biopsie du foie par voie jugulaire avec guidage échographique et/ou radiologique, avec prise de pression intraveineuse) ; le choc cardiogénique via le code R570 en DAS ; la MAT via le code M311 en DAS ou l'acte FEJF002 (séance non programmée de soustraction thérapeutique de plasma avec perfusion de produit de substitution) ; la CH via un code de cystite (N300, N308, N309) ou d'hématurie (N02, R31) en DAS ou un acte de décaillotage de vessie au bloc opératoire (JDJE001, JDJD002). Le passage en réanimation été identifié via l'attribution de supplément réanimation et le décès durant l'hospitalisation par le mode de sortie.

Résultats

Au cours de la période 2015-2020, 9631 séjours ont été identifiés pour un total de 9263 patients dans 26 établissements (hommes 58%). La moyenne d'âge était de 51,8 ans (SD 14,1). La durée médiane du séjour était de 35j (Q1–Q3 : 29–44) et celle entre l’admission et la greffe de 8j (Q1–Q3 : 7–10). Le diagnostic principal était la leucémie myéloblastique aigüe pour 3671 séjours (39%), suivie de la leucémie lymphoblastique aigüe pour 1043 séjours (11%).
Parmi les 9631 séjours, 865 comprenaient un supplément pour passage en réanimation (9%), 341 (3,5%) avaient un des critères de SOS, 90 (1%) un choc cardiogénique, 212 (2%) une MAT et 946 (10%) une CH. Concernant le mode de sortie d'hospitalisation, pour 635 (6,6%) des séjours, un décès intrahospitalier est survenu, 73% des patients sont rentrés à domicile, et 20% ont été transférés (HAD, SSR…) avec de fortes variabilités selon les établissements.
 
Discussion / conclusion

A notre connaissance, il s'agit de la première étude sur l’analyse des complications en post allogreffe à partir de telles bases de données en France. Le nombre de séjours identifié est concordant avec les données d'activité des greffes de CSH issues de la base ProMISe, rapportées par l'ABM annuellement. Deux SOS et 4 MAT seulement ont été déclarées dans le circuit de biovigilance entre 2018 et 2021, et de nombreuses complications (attendues mais sévères, donc à surveiller pour conformité avec le décret biovigilance de novembre 2016) n’ont pas fait l’objet de déclarations. Ce type d’étude pourrait donc permettre d’instaurer une surveillance régulière, plus précise des effets indésirables graves, voire plus globalement de réaliser une analyse du parcours des patients à la fois à l'hôpital mais aussi en médecine de ville et ainsi d’apporter des axes d’amélioration partagés par tous, sans surcroît de saisie par les centres.

INTRODUCTION
In allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (Allo-HSCT), the Clo-Baltimore (CloB) regimen is a variant of the Baltimore reduced-intensity conditioning (RIC) regimen that uses clofarabine in replacement of fludarabine and high-dose post-transplant cyclophosphamide (PTCY). This regimen provides good survivals for patients (pts) with myeloid malignancies (Chevallier et al., Oncotarget 2018). Yet, graft-versus host disease (GVHD) remains a major cause of morbidity and mortality in Allo-HSCT recipients. The administration of anti-thymocyte globulin (ATG) is a standard method to prevent GVHD in matched Allo-HSCT. Here, we retrospectively investigated whether the addition of ATG to CloB conditioning with PTCY was beneficial in terms of GVHD rates.
METHODS
This retrospective study included all consecutive Allo-HSCT adult recipients with myeloid malignancies transplanted between March 2014 and February 2022 in our hospital after CloB+/-ATG conditioning regimen. CloB consisted in clofarabine 30 mg/m²/day (d) from d-6 to d-2, cyclophosphamide 14.5 mg/kg/d on d-6 and d-5, and cyclophosphamide 50mg/kg/d on d+4 and d+5 after Allo-HSCT. In CloB+ATG, pts additionally received ATG 2.5mg/kg/d on d-2. GVHD prophylaxis consisted in the administration of cyclosporine A and mycophenolate mofetil to all patients. Graft source was exclusively peripheral blood stem cells. We determined overall (OS), disease-free (DFS) and GVHD relapse-free (GRFS) survivals, as well as non-relapse mortality (NRM) and relapse incidences.
RESULTS
Sixty-six pts (median age 61 years old, range 32-74) were included, with 36 pts treated with CloB conditioning between 2014 and 2017, and 30 with CloB+ATG between 2019 and 2022. Between the two periods other conditioning regimens were used in our Department.
Patient characteristics are reported in Table1. In the whole cohort, 18-months(m) OS, DFS and GRFS were 71±6%, 65±6%, and 55±6%, and 18-m NRM and relapse incidences were 14±4% and 21±5% respectively.
A higher proportion of high DRI was observed in the CloB group (36 vs 10%, p=0.03). The median follow-up was 68 months (m) in the  CloB cohort and 19.5 m in the CloB+ATG cohort. These two groups were otherwise comparable (Table 1).
A lower proportion of acute GVHD was observed in the CloB+ATG group (23.3 vs 50%, p=0.05), with no statistical differences in terms of chronic GVHD (p=0.49). Of note, no extensive chronic GVHD was observed in the CloB+ATG group (vs 11% in CloB patients, p=0.17)
In multivariate analysis, the addition of ATG to CloB conditioning was associated with a significant increase in 18-m GRFS (70±8% vs 43±8%, HR 0.38 [95%CI 0.17-0.85], p=0.02; Figure1). No differences were observed in terms of OS (HR 0.74, p=0.51), DFS (HR 0.58 p=0.22), NRM (HR 0.84, p=0.79), relapse rate (HR 0.51, p=0.25), median time of neutrophil (>1 109/L) and platelet (> 50 109/L) recovery (respectively 19d [range 12-27] vs 18d [8-32], p=0.69, and 36d [22-471] vs 31d [12-134], p=0.09).
The results were similar when considering only patients with a haploidentical donor (n=54), with a benefit in terms of GRFS in the ATG group in multivariate analysis: HR 0.30 (95%CI 0.12-0.73; p=0.008).
 
CONCLUSION
Addition of ATG to the Clo-Baltimore RIC regimen with PTCY improved GRFS rates in this cohort without increasing infection-related mortality nor relapse rate in pts with myeloid malignancies and matched or haplo-donors. This strategy should be more widely implemented.

Patient Characteristics according to conditioning

GRFS according to conditioning

La Réunion est un département d'Outre-mer situé dans l'Océan indien, dans un territoire sanitaire de près d'un million d'habitants. Le recours à l'allogreffe nécessitait jusqu'en 2021 un départ pour la métropole systématique. Avec les difficultés multiples qui s'ajoutaient à la maladie, le soin était souvent vécu comme une double peine pour les patients. Malgré une optimisation des filières et une réduction jusqu'à 2.5 mois sur place, le refus de partir restait la première cause de non-greffe pour les patients, avec une perte de survie observée (Cabrera et al. 2016).
Nous relatons ici l'établissement d'un premier centre de greffe sur le territoire ultra-marin pour répondre à un besoin d'autonomie sanitaire.
Nous détaillons en retour d'expérience:
-La pluralité des premières greffes et leurs évolutions (greffe Haplo, deuxième Allo, désimmunisation)
-Les processus d'établissement du projet, d'implications des équipes entières et des directions
-Le retour patient fortement positif et l'attrait primordial du soutien familial
-L'implication des équipes dès l'ébauche du projet dans la démarche qualité JACIE
-Les particularités locales et nos difficultés (plan Cyclone, éloignement, absence de recours régional de proximité, surcoût)
-Le partenariat avec Mayotte, département à la population très fragile et à la barrière culturelle très forte

Les premiers développements, très positifs, de notre centre nous invitent à partager ces expériences et nous impliquent à continuer notre dynamique d'autonomie, notamment en vue d'établissement des CAR-T cells.
 

Introduction: The use of anti-mold prophylaxis with anti-aspergillus activity is recommended for patients (pts) undergoing allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (Allo-HSCT) with high risk of fungal infection (Maertens, J Antimicrob Chemother 2018). Yet, few data are available regarding the use of posaconazole.
Methods: This retrospective study included all Allo-HSCT adult recipients having benefited from posaconazole therapy in our center as a primary anti-fungal prophylaxis for high-risk of fungal infection. The latter was defined as use of i)an alternative donor, ii)sequential conditioning regimen, iii)a regimen associated with severe mucositis, iv) post-transplant cyclophosphamide (PT-Cy) or v) previous allo-HSCT. Posaconazole was programmed to be initiated at day (D) 0 or D5/6 (in case of PT-Cy) and administered up to day 100. We report here on the residual concentration of posaconazole during the neutropenic phase then on the tolerance and efficacy of such prophylaxis in this cohort.
Results: Seventy high-risk pts (males 63.3%, median age 54 years old, range 20-73) received Allo-HSCT between April 2020 and December 2021 for a myeloid (n=51), lymphoid (n=17) or non-malignant hematological (n=2) disease and received posaconazole as a primary prophylaxis. The Sorror score at transplant time was ≥ 3 for 24 pts (33.8%). Thirty-two patients had already received posaconazole as a primary prophylaxis before Allo-SCT. Four patients had also received other antifungal agents before Allo-SCT.
All but one pts received posaconazole using the gastroresistant tablet form at a dose of 300mg/day. One patient received the drinkable suspension form at a dose of 200mg 3 times a day. Following prophylaxis initiation, serum posaconazole concentrations were available in 51 and 16 patients at medians of 9 and 39 days, respectively. A protective residual level of posaconazole (> 0.5mg/L) was achieved in 57% of the patients (n=29) at first assessment and 87.5% (n=12) at second evaluation.
Posaconazole was stopped early due to related-toxicity in 9 cases (12.6%), including liver toxicity in 7 pts, QT prolongation in 1 and skin hyperesthesia in 1. Treatment was restarted without recurrence of toxicity in 2 cases. Posaconazole was stopped early in 2 patients due to non-related toxicity, including one veno-occlusive disease and one hepatic acute GVHD. Posaconazole was temporary discontinued in 4 patients due to a suspected fungal infection before being restarted.
Most patients (n=59/70, 84.2%) did not present fungal infections while being under posaconazole therapy. Only 11 cases were documented with this complication (Table 1), including 8 invasive pulmonary aspergillosis (IPA; possible n=3; probable n=5), one possible invasive fungal infection and 2 mucormycoses (1 with possible IPA). Fungal infections occurred despite documentation of a protective residual level of posaconazole (> 0.5mg/L) in 5 of 6 evaluable patients. Of note, 9/11 patients had received PTCY as GVHD prophylaxis.
Conclusion: Posaconazole is a well-tolerated and efficient primary prophylaxis in recipients of Allo-HSCT at high-risk of fungal infection. As some fungal infections occured very early after D0 while prophylaxis started only a D5/6 after PTCY, our results suggest to propose posaconazole as early as the beginning of the conditionning together with dose monitoring.
 

Characteristics of 11 cases documented with fungal infections

Introduction: Before the availability of SARS-CoV-2 mRNA vaccines, COVID-19 infection was responsible for up to 21/25% of deaths in allogeneic stem cell transplantation (Allo-SCT) recipients. This incidence was significantly reduced after 2 successive vaccines but the humoral response was shown to wane after a few months. The interest of one or two boosters has been confirmed thereafter, with a persistent and significantly reduced incidence of severe forms or deaths due to COVID-19 infection. Indeed, over a median follow-up of 6 months after a-third shot, we have recently reported long-term high protection of Allo-HSCT recipients (Chevallier, Hematol Oncol 2022). Since these latter results were obtained mainly during the Delta wave, we have now considered the first semester of 2022 when the Omicron variant was predominant in France.
Methods: This monocentric observational study aimed at describing the incidence and severity of COVID-19 infections during the Omicron Wave (January 1st to June 30th 2022) in a cohort of 211 French allotransplanted patients (pts) who had been previously fully vaccinated (2 shots + 1 booster). Of them, 68 had also received a second booster between July 2021 and May 2022. Anti-SARS-CoV-2 mRNA vaccines were used almost in all pts. Some pts (n=12) had also received tixagevimab and cilgavimab (Evusheld) as preventive treatment. Severity was defined by hospitalization and/or death related to a COVID-19 infection. Finally, predictive factors of infection were analyzed, including in particular the number of boosters received and the pts humoral status.
Results: Characteristics of the cohort are described in Table 1. During the 6 months considered, 37 (17.5%) pts were documented with COVID-19 infection. This was significantly higher compared to the incidence seen in our cohort during the previous period (17, 5% vs 2,1%, p<0.001). Almost 90% of these infections were mild since only 3 (1.14%) hospitalizations (including one in intensive care unit, ICU) and 1 death (0.47%) occurred. The incidence of infection was significantly reduced in pts having received a second booster (8.8% vs 21.6%, p=0.03), although the hospitalization in ICU and the death were observed in this sub-group. Conversely, no influence on the rate of infection appeared related to a high anti-spike IgG titer (>250 BAU/mL) (15.8% vs 27.5%, p=0.13), a delay >2 years from the Allo-SCT (10.4% vs 19%, p=0.93) or an ongoing immunosuppressive/chemotherapy treatment (15.3% vs 18%, p=0.97). Interestingly, among the 10 patients who had contracted COVID-19 infection before January 2022, none showed reoccurrence of infection during the period considered.
Conclusion: During the Omicron wave in France, the incidence of COVID-19 infections has increased significantly in Allo-SCT recipients, although they were fully vaccinated (2+1 booster). However, almost 90% of these infections were mild and only 3 hospitalizations and one death were documented. This first indicates that anti-Spike mRNA vaccines remain efficient against Omicron variants. The significant protection against severe forms is likely related to a reactivation of memory immune responses upon infection. Indeed, after one year post-transplant, the majority of allotransplanted pts are well-protected after having been fully vaccinated (2 vaccines + 1 booster). However, a second booster seems to be even more protective and should be proposed to all allotransplanted patients.
 

Characteristics of the cohort

Introduction: Myeloid-derived suppressive cells (MDSC) are an heterogeneous group of immature myeloid cells with strong immunosuppressive activities. In mice models, MDSC modulate the function of alloreactive T cells and prevent graft versus host disease (GVHD) without impairing graft versus leukemia (GVL) effect. Data are limited in humans. Here we focused on the role of peripheral levels of monocytic-MDSC (mMDSC) in a cohort of adults with acute (both myeloid or lymphoid) leukemia (AML or ALL) having received Allo-SCT.

Methods: This prospective monocentric study aimed at documenting the impact of the percentage of mMDSC before and after allo-SCT in terms of incidence of acute and chronic GVHD, overall (OS) and leukemia-free (LFS) survivals, (grade 3/4 acute or extensive chronic) GVHD-free relapse-free survival (GRFS), relapse and non-relapse mortality (NRM) in a cohort of ALL or AML patients (pts). Inclusion was performed after informed consent at diagnosis as part of a more global study (Abstract ASH 2021 # 3465), pts who were ultimately transplanted being included in this sub-group analysis. mMDSC were defined by the minimal CD14+/CD11b+/CD33+/HLA-DR-/low immunophenotypic pattern, at variance from granulocytic MDSC that lack CD14 and express bright CD15. Cells were assessed using peripheral blood before conditioning then at day+60. mMDSC were expressed as a percentage (%) of total nucleated cells defined as CD45+. The study was registered at the French CNIL 2016-038 and approved by the Ethic Review Board of Nantes University Hospital.

Results: Among 73 AML and 14 ALL pts included at diagnosis, 47 and 9, respectively, were ultimately allografted between February 2018 and October 2021. Pts characteristics are provided in Table 1A. The median follow-up for alive pts from Day 0 was 24 months (range: 8-48). Considering the whole cohort, 2-year OS, LFS and GRFS were 61.9+6%, 55.9+7% and 32.4+6%, respectively, while 2-year NRM and Relapse incidence were 11+4% and 29.6+6%.
In pre-graft, 46 pts were evaluated at a median of 20 days from Day 0 (range: 6-83). The median % of mMDSC was 0.45% (range: 0-11.85) with no differences between AML and ALL (p=0.32). The best cut-off assessed by ROC analyses was 0.47%. According to this value, the incidence of cytologic relapse at 2 years was significantly higher in pts with >0.47% of mMDSC (14.5+8% vs 44.4+11%, p=0.02, Figure 1) while no impact on survivals, NRM or GVHD was observed. Of note, the incidence of relapse was similar between AML and ALL (29% vs 37.5%, p=0.95). In multivariate analysis (Table 1B), higher pre-graft mMDSC % remained associated with higher risk of relapse (HR: 3.71; 95%CI: 1.05-13.09, p=0.04).
At day+60, 42 pts were evaluated. The mMDSC median level was 0.52% (range: 0-5.03) with no differences between AML and ALL (p=0.32). No best cut-off was determined. Survivals were similar between pts with ≤ or >0.52% of mMDSC at this time. It was also the case for incidences of relapse, NRM and chronic GVHD. However, the incidence of severe acute GVHD (grade 3/4) was significantly and paradoxically higher in the group of pts with >0.52% mMDSC (33% vs 5%, p=0.04) suggesting a possible amplification of immunosuppressive mMDSC as a reaction to GVHD since the median time of GVHD grade 2-4 occurrence was 30 days (range: 20-123) post-transplant.

Conclusion: This prospective study demonstrates a negative impact of higher proportions of mMDSC before allotransplant in leukemic pts.

Introduction: the impact of peripheral cytokines (Ck) levels has been poorly studied in a context of allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (Allo-HSCT) for acute myeloid leukemia (AML).

Methods: This prospective study (NCT02693899) aimed to analyze peripheral levels of 8 Cks in 35 AML patients (pts) before conditioning (BC) then at Day (D) 0, 30, 60 and 100 post-Allo-HSCT by comparison to median levels from 20 healthy controls (C) (16 males, median age 48.5 yo). The levels of FLt3-ligand (FL), TNF-alpha, stem-cell factor (SCF), c-kit, IL-1 beta, IL-6, IL-10 and granulocyte-monocyte colony-stimulating factor (GM-CSF) were assessed (ELISA). 1313 and 157 samples were analyzed in pts and C, respectively. The impact of BC, D0 and D30 levels and secretion (secretors = pts with detectable Ck levels) on overall (OS), disease free (DFS) and GVHD and relapse free survival (GRFS) was assessed.

Results: See Tables 1 and 2.
At D0, IL-6 (p=0.0006), FL (p<0.001) and SCF (p=0.003) levels were higher in pts than C and for SCF levels on D30 (p=0.0009), D60 (p=0.001) and D100 (p=0.01). Median GM-CSF and c-kit levels were lower in pts at any time (p<0.001). Two-by-two paired Ck comparisons showed no correlation.
ELN2017 classification and disease-risk index (DRI) were significantly associated with OS and LFS by univariate analysis (UA), only the former remaining associated with both OS (HR 8.51; 95%CI 1.18-61.54, p=0.034) and LFS (HR 8.10; 95%CI 1.20-54.82, p=0.032) in multivariate analysis (MA). Only SCF, IL-6 and c-kit levels impacted survivals.
Higher BC SCF levels were associated with lower OS (p=0.02), LFS (p=0.01) and GRFS (P<0.001) by UA and with lower GRFS (HR 3.19; 95%CI 1.48-6.88, p=0.003) in MA, with a trend for lower LFS (HR 1.96; 95%CI 0.94-4.08, p=0.07). There was an association between the absence of SCF secretion and better OS, LFS and GRFS (p=0.02, p=0.02, p=0.03); c-kit secretion was associated with better OS (p=0.03) in UA. This remained true in MA for OS (HR 0.30; 95%CI 0.10-0.92, p=0.03); there was a trend between no SCF secretion and GRFS (HR 0.45; 95%CI 0.18-1.14, p=0.09) by MA.
Higher IL-6 levels at D0 were associated with lower OS (p=0.01) by UA and lower LFS both by UA (p=0.01) and MA (HR: 2.83; 95%CI: 1.04-7.70, p=0.04), with a trend for lower OS (HR: 2.55; 95%CI: 0.90-7.29, p=0.07) in MA. ROC curve analysis identified 7pg/mL as the best cut-off for D0 IL-6 levels which resulted, for pts under this level, in better 4-year OS (80% (62-1) vs 35.7% (18-69), p=0.02) and LFS (73.3% (54-99) vs 28.6% (13-63) p=0.01; Figure).
At D30, higher c-kit and lower SCF levels were associated with better OS (p=0.003 and p=0.01) and LFS (p=0.009 and p=0.04) by UA while c-kit levels remained associated with LFS (HR: 0.37; 95%CI: 0.17-0.80, p=0.01) by MA. The absence of SCF secretion was associated with better OS (p=0.03) and a trend for better LFS (p=0.07). c-kit secretion was associated with better OS (p=0.008), LFS (p=0.01) and a trend for better GRFS (p=0.07). Only c-kit secretion remained associated with better OS (HR: 0.15; 95%CI: 0.04-0.57, p=0.005), LFS (HR: 0.19; 95%CI: 0.06-0.62, p=0.006) and GRFS (HR: 0.40.95%CI: 0.16-1.00, p=0.05) by MA.

Conclusion: early higher IL-6 and SCF and lower c-kit levels appeared to be associated with lower survivals in AML pts after Allo-HSCT which might allow to propose therapeutic intervention to decrease relapses, either by modulating Ck levels or by starting early maintenance treatment post-Allo-HSCT.

Introduction: Cytomegalovirus (CMV) infection is a common complication after umbilical cord blood transplantation (UCBT) and it is important to estimate the individual risk at baseline. However, data on patients receiving UCBT are limited in published scoring systems.
 
Objective: The aim of this study was to develop a pre-UCBT prognostic score of CMV post-transplant infection.
 
Material and methods: A retrospective analysis of patients undergoing a first allogeneic UCBT from 2010 through 2019 was performed using data from the Société Francophone de Greffe de Moelle et de Thérapie Cellulaire (SFGM-TC) and Eurocord/EBMT registries. The study population was randomized into a derivation and a validation cohort with 984 and 422 patients, respectively. Using the derivation cohort, the categorical candidate predictors for the CMV risk score were selected based on a p-value < 0.05 after bivariate analyses using Fine-Gray model for competing risks. Finally, three risk groups (low, intermediate, and high) were created according to the beta-coefficients of the Fine-Gray multivariable regression model. The association between acute GVHD (aGVHD) and CMV by risk group was assessed. The risk score was tested in the validation cohort.
 
Results: The significant risk factors in the pre-UCBT context were age ≥ 36 years (p=0.002), patient CMV seropositivity (<0.0001), and ≥ 2 HLA mismatches (p=0.007). One scoring point was assigned if age ≥ 36 years at UCBT, 2 points if HLA mismatches ≥ 2, and 3 points were assigned to patient CMV seropositivity. In both the derivation and validation cohorts, patients in the high-risk group (scores 4-6) were more prone to develop CMV infection compared to the low- and intermediate-risk groups. Moreover, in the high-risk group of the derivation cohort, patients with acute GVHD developed more CMV infections compared to those not having GVHD (63.7% versus 46.3%, p=0.003).
 
Discussion: The rationale of creating a risk score to predict CMV infection after UCBT was to better stratify patients undergoing this type of transplant. Previous CMV risk score studies have been performed considering, mainly, adult graft sources; therefore, the results and conclusions may not ideally apply to all UCBT recipients. Our study used a large population of UCBT recipients from different transplant centers in order to evaluate the feasibility of establishing a clinical score to stratify the risk of CMV infection in patients undergoing UCBT.
 
Conclusion: Our scoring system could be easily implemented in the clinical practice in order to predict the probability of CMV infection. This study gives an evaluation of pre-transplant factors predicting the risk of CMV infection in UCBT recipients and it is the basis for optimizing the monitoring of CMV infection and the use of preemptive therapies.

Introduction:  Vaccines against SARS-CoV-2 have shown remarkable efficacy and thus constitute an important preventive option against COVID-19 infections in immunocompromised hosts. Several studies have now demonstrated a good response to SARS-CoV-2 mRNA vaccines in allogeneic hematopoietic stem cell transplant (Allo-HSCT) recipients. In the specific context of acquired severe aplastic anemia (ASAA), some data exist on post-vaccination results after treatment by horse antithymocyte globulin (hATG) and cyclosporin (CsA). However, as yet, no specific results are available for ASAA patients (pts) who received an Allo-HSCT.
 
Methods: This real life monocentric observational study aimed at describing the incidence and severity of COVID 19 infections and humoral responses after anti- SARS-Cov-2 mRNA vaccines in a cohort of 27 ASAA pts who received either an allo-HSCT (n=13) or hATG+CsA (n=14) between 2012 and 2022 in our Hematology Department. Data were collected in personal file records, during routine follow-up visits or using phone contact. COVID 19 infection severity was defined by the need for hospitalization or subsequent related death. Antibody responses to the SARS-CoV-2 spike protein receptor–binding domain were also considered, the highest value being >2500 BAU/mL. Based on a threshold of 250 BAU/mL, responses were classified as “weak” or “good, higher levels having been shown to correlate with the rate of neutralizing antibodies.
Results:  Pts characteristics are given in Table 1. None of the pts had presented a COVID-19 infection before V1. Afterwards, almost half of the pts (n=13, 48%) were documented with COVID 19 infection, mostly as a non-severe form (n=12, 92%, asymptomatic n=3 and mild n=9). Only one severe COVID 19 infection occurred. This pt had been treated with hATG+CsA 18 months earlier and was the only one who had not been vaccinated.
The incidence of infection was similar between allo-HSCT (8/13) and ATG+CsA (5/14) pts (p=0.26), as well as in pts with idiopathic ASAA (8/12) or paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (5/15; p=0.13). No difference either was seen between pts still under immunosuppressive therapy (CsA; 3/8) or not (10/19; p=0.76). All 3 patients who received only V1 and V2 vaccines contracted the infection and the incidence of COVID-19 infection was significantly lower in patients with 4 vaccines (11%) vs those with 3 (57%; p=0.05).
After a median time of 36 days (range: 20 - 232) after V2, 75% (n=12/16) of the pts showed a good antibody response, 11 reaching the highest IgG titer, and this proportion increased after V3 and V4. Indeed, at a median time of 70 days (range: 17 - 221) after V3, 95% (n=19/20) showed a good antibody response, 17 pts reaching the highest IgG titer. At a median time of 60 days (range: 2-195) after V4, 100% (n=7/7) of the pts showed a good antibody response, 4 reaching the highest IgG titer.
Conclusion: In this cohort, almost half of adults with ASAA presented with COVID-19 infection with no difference between patients who received an allo-HSCT or hATG+CsA. None of the vaccinated patients presented a severe form of COVID-19 infection, indicating a very good efficiency of the vaccines. This protection increased with the number of shots as the incidence of COVID-19 was lower and the number of pts reaching good humoral response was higher after a second booster. As the latter seems to be more protective, it should be proposed to all ASAA adult patients.

Table 1

Incidence cumulée d'infection à SARS-CoV-2 dans l'ensemble de la cohorte.

Caractéristiques des patients à l'inclusion.

Introduction
Les déficits immunitaires primitifs (DIP) sont un ensemble hétérogène de pathologies génétiques affectant le système immunitaire. Une atteinte spécifique pulmonaire, infectieuse ou non-infectieuse, est fréquente et responsable d’une morbi-mortalité importante. L’allogreffe de cellules souches hématopoïétiques (CSH) est le seul traitement curatif et peut s’envisager si le diagnostic génétique est associé à un pronostic péjoratif, dans le cas d’infections sévères, d’hémopathie, ou en cas d’atteinte d’organe impactant le pronostic à long terme. L’objectif de cette étude est de décrire l’évolution pneumologique après allogreffe.

Matériel et méthode
Recueil rétrospectif des données médicales des sujets atteints de DIP allogreffés de CSH à partir de l’âge de 16 ans dans le service d’Hématologie de l’hôpital Necker entre 2011 et 2020. Le critère de jugement principal était la fréquence des infections respiratoires sévères. Les critères secondaires étaient l’évolution fonctionnelle et radiologique ainsi que la fréquence de survenue des complications spécifiques de la greffe.

Résultats
Trente-deux patients ont été inclus, 13 (41%) avaient un déficit immunitaire combiné, 10 (31%) avaient une granulomatose septique chronique et 6 (19%) avaient une dysrégulation du système immunitaire. La durée de suivi médiane était de 4 ans [IQR 1,7-8,8] en pré-greffe et de 5 ans [IQR 3,5-6,4] en post-greffe. Sept patients sont décédés dans la première année après la greffe. Les taux annualisés d’infections sévères pulmonaires étaient de 0,3 [IQR 0-0,48] avant la greffe et de 0 [IQR 0-0,26] après la greffe, soit une réduction de 0,28 (IC95 [- 0,08 – 0,63], p = 0,12). Concernant les EFR, on observait un gain moyen de VEMS de +1,12 %/an et de la CV de +2,85 %/an en post-greffe. Les dilatations des bronches visualisées sur les scanners thoraciques avaient tendance à s’aggraver durant la période pré-greffe (+2 points au score Bhalla) alors qu’elles s’amélioraient (- 1 point au score Bhalla) dans la première année post greffe puis se stabilisaient. Les autres atteintes radiologiques étaient de l’emphysème, des micronodules et nodules, des cavités et des condensations rétractiles cicatricielles. Trois patients ont développé une bronchiolite oblitérante.

Discussion
Nous avons observé une réduction non significative des infections respiratoires sévères, possiblement par manque de puissance dans cette étude de petit effectif. Ceci est à mettre en balance avec une réduction de la charge thérapeutique chez la plupart des patients. La correction du déficit immunitaire a également permis une amélioration de l’atteinte bronchique au scanner et une stabilisation de la fonction respiratoire. L’incidence de la bronchiolite oblitérante (9,4%) était comparable aux valeurs attendues.

Conclusion
Notre étude montre un bénéfice de l’allogreffe sur le statut respiratoire des patients avec un déficit immunitaire primitif.
 

Introduction
In recent years, post-transplant cyclophosphamide (PT-Cy) has become an essential component for GVHD prophylaxis in T-cell replete haploidentical (HRD) stem cell transplantation; it is now being evaluated in unrelated donor (UD) transplants, where antithymocyte globulin (ATG) remains standard. We report the outcome of a cohort of recipients transplanted from HLA-10/10 matched unrelated donor (MUD), treated with PT-Cy (n=30); we additionally performed a retrospective comparison with a historical control group treated with ATG (n=64) (Table 1).

Results 
The day-100 cumulative incidence of grade 2-4 acute GVHD was significantly lower in the PT-Cy group (23% vs. 45%, p=0.014). We observed also a lower 1-year cumulative incidence of all grades and moderate to severe chronic GVHD in the PT-Cy group (all grades: 13% vs 33%, p=0.029; moderate to severe: 10% vs. 27%, p=0.039) (Figure 1).

No significant difference was observed in the incidence of relapse (20% in the PT-Cy group vs 11% in the ATG group, p=0.628), non-relapse mortality (3% vs 11%, p=0.169), progression free survival (77% vs 78%, p=0.638) and overall survival (87% vs 83%, p=0.602) (Figure 2).

Median time from allo-SCT to neutrophil (>0.5G/L) and platelet (>20G/L) recovery was significantly delayed in the PT-Cy group (neutrophil: 19 vs 17 days, p=0.049; platelets: day 26 vs 10, p<0.001) (Figure 1).

First year after allo-SCT, we followed the GVHD and the immunosuppressive treatment (IST) prevalence in disease free patients as a surrogate marker of quality of life. At 6 months, 5% and 36% in the PT-Cy group were living with GVHD and IST respectively, with corresponding values for the ATG group being 26% (p=0.030) and 64% (p=0.049) (Figure 3).

Discussion
Our results corroborate in part the meta-analysis by Gao et al. Patients receiving PT-Cy developed a significantly lower incidence of acute GVHD compared to those receiving ATG (2-4 aGVHD : HR = 0.63, 95%CI = [0.45-0.89], p=0.009). They showed in addition a significantly lower NRM (HR = 0.59, 95%CI = [0.48-0.73], p<0.001) and better OS (HR = 0.62, 95%CI = [0.53-0.73], p<0.001) and PFS (HR = 0.76, 95%CI = [0.62-0.93], p=0.007), while CIR and cGVHD were comparable. However, these studies did not include only UD allo-SCT. PT-Cy was mostly given to patients receiving haplo-SCT while UD patients were given ATG in most cases.

Recently, the prospective randomized study of Brissot et al. did not find significant difference in GVHD prevention using ATG or PT-Cy for patients undergoing allo-SCT after FB2 RIC regimen (180-day 2-4 acute GVHD: 34.9% vs. 24.3%, p=0.530; 1-year chronic GVDH all grades: 26% vs. 30.2%, p = 0.560). However, it is important to note that this study includes both matched related and unrelated donor while our study only focused on MUD allo-SCT.

A recent large retrospective registry database analysis from the ALWP of EBMT also failed to demonstrate a significant difference between a PT-Cy and ATG based GVHD prophylaxis in MUD allo-SCT. However, this study includes patients receiving MAC regimen in a large proportion (47%), and 10% of patients received bone marrow as graft.

Conclusion : 
We suggest that PT-Cy is an effective GVHD prophylaxis in 10/10-HLA MUD allo-SCT, representing a valuable alternative to ATG. However, although routinely feasible with promising overall outcomes, the use of PT-Cy in this context needs to be further optimized to improve its safety, notably in terms of related early toxicities.

Table 1. Patients characteristics

Figure 1: Neutrophils (A) and platelets (B) recovery, cumulative incidences of grade 2–4 acute GVHD (C) and moderate to severe chronic GVHD (D) in the PT-Cy and ATG groups.

Figure 2: Non-relapse mortality (A), relapse incidence (B), progression free survival (C) and overall survival (D) in the PT-Cy and ATG groups

Figure 3: Immunosuppressive treatments (A) and GVHD (B) prevalence in the PT-Cy and ATG groups. (* p<0.05)

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INTRODUCTION: Early complications of endothelial origin after allogeneic hematopoietic cell transplantation (alloHCT) include a range of life-threatening complications. Endothelial dysfunction is mainly mediated by alloreactivity and it is crucial to develop new tools to detect patients at risk of early mortality. We conducted a retrospective study in order to assess the role of the von Willebrand factor (VWF) as a potential predictive biomarker of transplant-related endothelial dysfunction.
 
METHODS: We included all adult patients (n= 127) having received an alloHCT from February 2019 to November 2021. No patients had von Willebrand disease or haemophilia A.
Diagnosis of transplant-related endothelial dysfunction, i.e., transplant associated thrombotic microangiopathy (TA-TMA), lung endothelial injuries (idiopathic pneumonia syndrome and diffuse alveolar hemorrhage), engraftment (ES) and capillary leak (CLS) syndromes, was assigned based on laboratory values and clinical features by performing systematic retrospective chart review. Turbidimetric assays of VWF antigen levels (VWF:Ag)  and of binding capacity of VWF to GPIbIX (VWF:RCo) were performed on day -4, day 0 and day +28 of the alloHCT.
 
RESULTS: Median follow-up was 659 days (IQR: 430 - 905 days). The probability of relapse-free survival was 65% and overall survival (OS) was 67% at two years. 28 patients (22%) had at least one endothelial-related complication within a four-week window after alloHCT: 18 CLS, 10 TA-TMA and 7 ES. Lung-specific complications affected 11 patients. All conditioning regimens induced both synthesis and activation of VWF. Using univariate analyses, we found that a high day -4 VWF:RCo was associated with the occurrence of endothelial complications (Odds ratio, OR: 2.62, p= 0.033, for value above 200%), as well as elevated EASIX score and C-reactive protein level at day 0. Multivariate analyses showed that only CRP and EASIX retained independent impact on the occurrence of endothelial complications, with respective OR of 4.27 (p=0.028) and 2.5 (p=0.055). Introduction of an interaction effect between the VWF:RCo and the EASIX score restored a trend for VWF:RCo pre-alloHCT (OR: 2.7, p= 0.11). Survival was strongly influenced by the occurrence of endothelial-related complications (Fig. 1), with OR for OS and NRM of 2.14 (p=0.025) and 5.11 (p<0.001), respectively. In univariate analyses, VWF:RCo-pre, EASIX and CRP constituted risk factors for both survival and non-relapse mortality, even in patients not developing endothelial-related complications. Multivariate analyses confirmed the impact of the biomarkers.
 
CONCLUSIONS: Conditioning regimens increase VWF:Ag and VWF:RCo in alloHCT. Moreover, VWF:Rco > 200% four days before transplant appears to be a biomarker of endothelial vulnerability and a risk factor for the development of endothelial-related complications. Our data suggest also that CRP level and EASIX score on day 0 are important risk factors for these complications. Beyond being predictive for such severe complications, they were associated with survival and all causes’ non-relapse mortality. If confirmed in a larger, multicentric clinical cohort, this could lead to the development of a revised EASIX-pre score, including VWF:RCo and CRP, to evaluate the degree of endothelial vulnerability, the probability of transplant-associated endothelial dysfunction and the risk of death after alloHCT.
 

Figure 1. OS according to the occurrence of endothelial disease (A) or high level of VWF:RCo four days before alloHCT (B).

Introduction
High levels of donor specific antibodies (DSA) to anti-human leucocyte antigen (HLA) in HLA-mismatch allogeneic stem cell transplant (alloSCT) recipients are associated with a high risk of primary graft failure (PGF) and a poor overall survival rate. Several desensitization strategies have been reported, but not all of them lead to successful engraftment. We report the effectiveness of a desensitization protocol combining anti-CD20 antibody infusions and plasmapheresis for patients with high DSA-levels undergoing haploidentical alloSCT for hematological diseases.
Patients and method
Patients with a DSA mean fluorescence intensity (MFI) > 1000 before undergoing alloSCT were treated with up to 3 weekly Rituximab infusions and at least 4 sessions of therapeutic plasma exchange (TPE) every 48 hours before starting conditioning regimen. DSA levels were monitored before initiating the conditioning regimen and alloSCT was cancelled if MFI did not decrease below 3000.
Results
Between 2018 and 2022, 8 consecutive patients for whom an alloSCT with an haploidentical donor was planned completed the desensitization protocol. Five of them were treated for hematologic malignancies and 3 for other hematological conditions (sickle cell disease for two and aplastic anemia for one).
Patients received a mean 6 TPE procedures (range 4-10) and a mean of 2 Rituximab infusions.
Mean pre-treatment DSA MFI was 6961 (range 1721-14928). Four patients had elevated DSA to class I and 4 to class II. Three patients had a “reactivity score” of 6 (MFI between 1000 and 3000) and 5 a “reactivity score” of 8 (MFI > 3000).
Except for one patient for whom alloSCT was cancelled due to the desensitization failure, we observed a decrease of the DSA score allowing the transplantation procedure for the other 7. Four patients received thiotepa, busulfan and fludarabine-based regimen and 3 a total body irradiation, fludarabine and cyclophosphamide-based regimen. All patients received post-transplant cyclophosphamide as graft versus host disease (GVHD) prophylaxis. The stem cell source was bone marrow for all patients.
All patients allografted successfully engrafted. Median time to neutrophil recovery (neutrophils ≥ 0.5 G/L) was 21 days (range 17-31). Median time to platelet recovery (platelets > 50 G/L) was 30 days (range 19-273). Day 30 and D100 chimerism was mainly donor (>90%) in all patients. With a median follow up of 18 months, we did not observe any late graft rejection, no GVHD, and only one patient died due to acute myeloid leukemia relapse.
Conclusion
These results suggest that a desensitization protocol combining TPE and Rituximab for haploidentical alloSCT recipients with high DSA levels is feasible and can prevent PGF, allowing the alloSCT procedure.

Background: Allogeneic stem cell transplantation is a curative option of patients older than 60 years of age with AML and high risk MDS. In this situation, the development of haploidentical transplantation (Haplo-SCT) with post transplantation cyclophosphamide (PT-Cy) allowed extending the feasibility of Allo-HSCT. However, there is few data specifically focusing on Haplo-SCT in AML/MDS patients over 70 years, for whom the benefit-risk balance of Haplo-SCT is still a matter of debate. 
Aims: To evaluate the outcome of patients older than 70 years with AML or high risk MDS who underwent Haplo-SCT.
Methods: This retrospective study included consecutive AML or MDS patients older than 70 years who received first Haplo-SCT from 2013 to 2021 in our center. All patients had the same transplantation modalities: 1) Non-myeloablative conditioning regimen as previously described (Fludarabine, cyclophosphamide and 2-Gray TBI); 2) Peripheral blood stem cells (PBSC) as graft source; 3) GVHD prophylaxis with PT-Cy, cyclosporine A and mycophenolate mofetil; 4) G-CSF from day+5 to neutrophil recovery. Prophylactic donor lymphocyte infusion (DLI) was initially planned after day+60 in absence of GVHD.
Results: We analyzed 45 patients who met inclusion criteria, 23 with AML and 22 with MDS. The median age was 72 years (range: 70-75). HCT-CI was >= 3 in 22 patients (49%). At the time of Haplo-SCT, 22/23 AML patients were in CR (17 CR1 and 5 CR2) and one patient had refractory AML. Disease status at Haplo-SCT for MDS was CR, PR, marrow CR and active disease in 12, 2, 1 and 7 patients, respectively. All patients received pre transplantation treatment with intensive chemotherapy and/or azacytidine, except one MDS patients who underwent upfront Haplo-SCT. Disease risk index was high or very high in 11 patients (24%), and intermediate in 34 patients (76%). Median follow up was 36 months (95%CI: 25-43).
Grade 2-4 and 3-4 acute GVHD at day+100 was 33% and 7%, respectively. There was no early death (at day+100: OS=100%; NRM=0%). At 3 years after Haplo-SCT, the cumulative incidence of all grades and moderate to severe chronic GVHD was 37% and 28%, respectively. Half of the cases of chronic GVHD occurred after prophylactic DLI. The 3-year cumulative incidence of NRM was 20%. In AML patients, the 3-year CIR, PFS and OS were 17%, 61% and 64% respectively. Corresponding values for MDS patients were 26%, 56% and 66%, respectively. Ten patients received prophylactic DLI. Among them, one died from late NRM (urothelial metastatic cancer after 2 years post Haplo-SCT) and one patient relapsed and subsequently died from AML (complex karyotype, CR2). The 8 remaining patients who received prophylactic DLI are still disease free at last follow up. As surrogate marker of quality of life, we evaluated the prevalence of GVHD and immunosuppressive treatment (IST) in disease free patients. At 2 years after Haplo-SCT, 87% of disease free patients are living without GVHD and without IST.
Conclusion: Haplo-SCT in patients older than 70 years with AML or high risk MDS is feasible without early NRM. The use of PBSC and prophylactic DLI may explain the low incidence of relapse and long-term survival. Our results support that selected patients older than 70 years can achieve promising outcomes after non-myeloablative Haplo-SCT using PBSC, confirming that age by itself and the absence of an HLA-matched donor should not be considered as firm contraindication for transplantation.
 

PFS in AML and MDS patients

Prevalance of GVHD and immunosuppressive treatment (IST) among disease free patients within 2 years post Haplo-SCT

Introduction :
La maladie veino-occlusive (MVO)  ou syndrome d’obstruction des sinusoïdes  (SOS) est une complication après allogreffe de cellules souches hématopoïetiques (CSH). L’incidence était estimée  entre 8 et 14%  avec l’utilisation de conditionnements myéloablatifs (MAC).  La mortalité sans traitement est de  80% en cas de MVO/SOS sévère, et avec traitements , 60%. Les données du registre DEFIFrance  (présentées à l’EBMT 2021)  estiment  une mortalité de 40% à J100 pour les formes sévères à très sévères et de 60% à 1 an.
Objectif :
On a souhaité évaluer l’incidence et les caractéristiques des patients présentant une MVO chez les patients allogreffés au CHU de Besançon entre 2015 et 2021 .Les critères de diagnostic de la MVO étaient les critères EBMT.
Matériel et méthodes :
On a analysé les caractéristiques des patients ayant reçu du defibrotide de 2015 à 2021. On a estimé l’incidence de la MVO en analysant les patients ayant reçu une allogreffe de CSH pendant la même période de temps.
Résultats :
Nous avons identifié  20  patients ayant reçu du defibrotide sur la période étudiée. Uniquement 9 patients réunissaient les critères EBMT de diagnostic de la MVO et avaient reçu une allogreffe de CSH.
Les caractéristiques de ces 9  patients sont : médiane d’âge 53 ans, 5 hommes; principale indication d’allogreffe leucémie aiguë myéloïde ou lymphoïde ; le conditionnement était type MAC pour 5 patients ; 2 patients ayant reçu un RIC  avaient déjà reçu une greffe ; les 2 autres avaient reçu un conditionnement avec thiotepa ; le source du greffon était la moelle pour un seul patient ; le greffon était phéno-identique pour 5 patients ; 1 seul patient était en première rémission complète ; 60% patients ont présenté une réaction du greffon cotre l’hôte aiguë.
La médiane de diagnostic de la MVO était de 11 jours ; le defibrotide   a été débuté le jour même du diagnostic, avec une durée médiane d’administration de 21 jours ; tous les patients ont été évalués  par échographie Doppler abdominale.  7 patients ont répondu au traitement et  5 patients sont toujours vivants. La tolérance du traitement était bonne, un seul patient a présenté des hémorragies intra-alvéolaires. Un seul patient est décédé en raison de la MVO .
La survie à J100 de ces patients était de 66%, alors que la survie à J100 globale des pattients greffés sur la période étudiée était de 90%.
Entre 2015 et 2021, 317 allogreffés de CSH ont été réalisés dans notre centre; l’incidence de MVO est donc de 2,83%.
En 2015 33% des patients ont reçu un conditionnement atténué ; la médiane d’âge des patients était de 52 ans; l’utilisation de ce type de conditionnement en 2021 est de 86%, avec une médiane d’âge de 60 ans.
Discussion :
L’incidence cumulée est de 9 cas pour 317 allogreffes, soit de 2,84 % pour la période étudiée ; cette incidence est  en rapport avec l’augmentation progressive de la proportion des  conditionnements atténués, possiblement expliquée par une médiane d’âge plus haute.
Une étude retrospective de l’American Society oh Hematology fait état d’une incidence de 1.6% pour la MVO étudie sur 10 ans, pour des patients ayant reçu de conditionnements atténués.
Les données de survie à J100 et efficacité du defibrotide sont similaires aux données de  vie réelle de l’étude de Mary Nauffal  sur la période 2016-2019.
Conclusion
Malgré l’utilisation  des conditionnements atténués, la MVO reste une complication préoccupante ; le diagnostic et l’instauration précoce du traitement sont primordiales.
 
 
 
 

Introduction : L’allogreffe de CSH est une option thérapeutique curative dans les LAM. Cette  étude rétrospective  expose les résultats à long terme de cette procédure chez les patients (pts) de moins de 18 ans atteints de LAM.
Matériel et méthodes : De septembre 1998 à décembre 2021, 178 pts âgés de moins de 18 ans présentant une LAM ont bénéficié d’une allogreffe de CSH. L’âge moyen est de 11 ans (4-17) et le sex-ratio (M/F) de 1,09. Le délai diagnostic-greffe est de 9 mois (3-66). A la greffe, 146 pts (82%) étaient en première rémission complète (RC), 24 pts en deuxième rémission et huit en poussée blastique. L’allogreffe est génoidentique chez 170 pts et haploidentique chez 8 pts ; le conditionnement est myéloablatif chez tous les pts. La prévention de la GVHD a comporté l’association ciclosporine-méthotrexate chez 170 pts, mycophénolate mofétil et ciclosporine chez 8 pts, et 11 pts ont reçu du SAL. Cent soixante trois pts (91,5%) ont reçu un greffon de CSP avec un taux moyen de CD34 : 7,99 x 10⁶/Kg (1,5-23,9), quatorze pts ont reçu un greffon médullaire avec un taux moyen de cellules nucléées : 3,69 x 10⁸/Kg (1,68-5,04) et deux pts ont reçu un greffon de sang placentaire avec un taux de CN respectivement à 4,02 et 4,8 x 10⁸/Kg.  En Mai 2022, le recul minimum est de cinq mois et le maximum de 284 mois.
Résultats : L’aplasie a été constatée chez tous les pts et la sortie d’aplasie est observée en moyenne à  J15 jours (7-29). Cent quatre pts (58,42%) ont été transfusés par des culots globulaires avec une moyenne de 1,4/pt, et 166 pts (93,3%) ont reçu des concentrés plaquettaires (1,6/pts). Trois pts (1,68%) ont présenté une MVO résolutive, 21 pts (11,8%) ont eu une réactivation CMV dans un délai moyen de 72 jours (19-237). Une GVHD aiguë est observée chez 49 pts (27,5%) dont 12 (6,74%) de grade III-IV, une GVHD chronique est notée chez 58 pts (36,47%) dont 42 (26,4%) de forme extensive. La rechute est survenue chez 49 pts (27,5%) dont : 1ère RC : 34, 2ème RC : 9, avec une différence significative entre 1ère RC et 2ème RC (P=10-6) et blastique : 6 pts. Cent deux pts (57,3%) sont vivants en rémission complète avec un suivi médian de 111 mois (7-284) et 76 pts (45,45%) sont décédés dont 31 (17,4%) lié à la TRM (GVHD :16, infection : 8, rejet : 3, syndrome de fuite capillaire : 1, pancréatite aigue :1, insuffisance rénale aigue : 1, trouble métabolique : 1) et 45 pts  (25,28%) de rechute. Les survies actuarielles globale et sans évènements à 23 ans sont respectivement 58% et 54%. La survie globale des pts en 1ere RC (64,4%) est meilleur que celle des pts en 2eme RC (38,84%) mais la différence n’est pas statistiquement significative par contre en terme de SSE, la différence est statistiquement significative (60,02%/32,6%) (P=0,02).
Conclusion : Cette étude avec un suivi à très long terme montre l’intérêt de la greffe de CSH comme une arme thérapeutique efficace dans les LAM de l’enfant. Cependant le problème de la rechute post greffe reste posé en raison de sa fréquence et de son évolution péjorative.

Introduction :
Cette étude rétrospective a pour but de comparer la reconstitution immunitaire humorale chez des enfants allogreffés de cellules souches hématopoïétiques (CSH) pour des pathologies malignes ou bénignes entre 2008 et 2018 à l’institut d’hématologie et d’oncologie Pédiatrique de Lyon, et ayant reçu ou non des injections de rituximab pour traitement pré-emptif d’une réactivation de l’Epstein-Barr Virus (EBV).
Matériel et méthodes :
114 patients sur les 315 ayant bénéficié d’une transplantation de CSH à l’IHOPe sur la période d’étude ont pu être inclus : 57 patients ayant reçu du Rituximab préemptif contre l’EBV, selon les recommandations de l’ECIL et 57 témoins appariés sur la pathologie, n’ayant pas reçu de Rituximab.
Les analyses réalisées portaient sur la durée de substitution en Ig chez les patients en post-greffe (reflet du dosage pondéral en Ig) et sur la recherche d’une corrélation avec le nombre de lymphocytes T (LT CD4+) et de lymphocytes B (LB CD19+) à un an de la greffe.
Résultats :
Les durées médianes de substitution en Ig étaient de 9.5 mois pour les patients ayant reçu du Rituximab contre 4 mois pour les témoins (p<0.001). 32% des enfants traités étaient toujours substitués à un an de la greffe contre 7% dans le groupe d’appariement. La médiane de LB CD19+ des patients traités par Rituximab à un an de la greffe était significativement plus basse que celle des témoins : 420 versus 611 LB CD19/µL (p=0.019). On ne retrouvait pas de différence sur la reconstitution des LT CD4+ à un an de la greffe. Au sein des patients ayant reçu du Rituximab, la médiane de LB CD19+ était significativement plus basse chez les patients toujours substitués à un an de la greffe (158 LB CD19/µL contre 559 avec un p < 0.001). 50% des patients toujours substitués à un an avaient néanmoins atteint le seuil satisfaisant de 200 LB CD19/µL. Les greffes géno-identiques semblent avoir un effet protecteur contre la réactivation EBV mais surtout contre l’hypogammaglobulinémie prolongée puisqu’aucune n’a nécessité de substitution jusqu’à un an post-greffe. Il n’y avait pas de différence d’incidence de GvH aigue dans les 2 groupes mais en revanche une incidence de GvH chronique extensive plus importante dans le groupe Rituximab (p=0.014).
Discussion et conclusion :
Les enfants ayant reçu du Rituximab en post-allogreffe de CSH présentent une hypogammaglobulinémie prolongée avec nécessité de substitution en Ig bien plus longue que les patients témoins. Cependant, cela ne semble pas uniquement s’expliquer par une lymphopénie B. Une étude complémentaire pourrait être nécessaire pour analyser les sous-populations de LB et notamment une possible immaturité fonctionnelle des B transitionnels, ou encore pour rechercher un effet qualitatif du Rituximab sur les cellules T. Enfin, il serait nécessaire de prendre en compte l’âge des donneurs et receveurs, démontré récemment comme facteur influençant la reconstitution immunitaire et d’étudier plus précisément le profil lymphocytaire du donneur.

Box plot représentant le nombre de CD4 (a, c) et de CD19 (b, d) un an après une greffe de cellules souches hématopoïétique : (a, b) : entre les patients ayant reçus du rituximab et le groupe contrôle (c, d) : au sein des patients ayant reçu du rituximab,

Introduction Le sténose grêlique et colique après allogreffe de cellules souches hématopoïétiques est rare et peu décrite (quelques cas rapportés), probablement secondaires à une GVH digestive. Sa prise en charge n’est pas codifiée. L’objectif de ce travail est de décrire, à l’échelle nationale, les signes d’appel, les moyens diagnostiques, le traitement et le devenir des sténoses digestives après allogreffe de CSH chez des patients suivis en pédiatrie.
Méthodes  Il s’agit d’une étude rétrospective multicentrique. Les 15 centres de greffe pédiatrique de CSH ont été contactés pour retrouver les patients ayant présenté une sténose digestive basse (grêlique ou colique) post TCSH, sans limite d’âge.
Résultats Treize patients, greffés entre 2008 et 2020 ont été identifiés dans 8 centres pédiatriques. L’âge médian au moment du diagnostic de sténose était de 8 ans (1-17). Le délai médian par rapport à la greffe était de 420 jours (299-545). Tous les patients avaient présenté une GVH digestive aigue, majoritairement cortico-résistante (12/13) et une GVH chronique extensive. Huit patients étaient encore sous traitement immunosuppresseur. Tous les patients étaient symptomatiques: les symptômes les plus fréquents étaient des douleurs abdominales paroxystiques (12/13) et des vomissements récurrents (11/13). Quatre patients avaient présenté des épisodes de sepsis évoquant une translocation bactérienne d’origine digestive. Seuls 2 patients ont présenté un syndrome occlusif. Le diagnostic de sténose digestive a été réalisé par entero-scan ou entero-IRM chez 6 patients (visualisation directe de la sténose), par TDM abdominale chez 5 patients (dilatation en amont), par coloscopie (sténose anale et sigmoïdienne) chez 2 patients. 4 patients ont eu un TOGD et une échographie abdominale qui n’ont pas permis de visualiser de sténose. Un patient a eu une TDM injectée normale. Le site de la sténose était grêlique chez 12 patients (majoritairement iléal (8/12)) et colique chez un patient. La sténose était multi-étagée chez 10 patients. Une documentation histologique a été obtenue chez 12 patients (pièce opératoire pour 10 patients et biopsie chez 2 patients), qui a retrouvé un aspect cicatriciel chez 2 patients (atrophie de la muqueuse), actif chez 3 patients (corps apoptotiques, fibrose de la muqueuse, ulcérations diffuses), mixte chez 6 patients, et un infarcissement hémorragique chez un patient. Un traitement médical a été proposé en première ligne à 6 patients, sans efficacité: anti TNF (n=4), corticoïdes (n=3), antibiotiques (n=2), rapamune (n=1), cellules mésenchymateuse (n=1). Une résection-anastomose en un ou deux temps a été réalisée chez 10 patients et une dilatation endoscopique anale et sigmoïdienne chez un patient. Deux patients en situation palliative ont été récusés pour la chirurgie. Après chirurgie aucune récidive n’a été observée. Un patient a présenté une péritonite, un un volvulus et un un grêle court. Tous les patients opérés sont devenus asymptomatiques. Aux dernières nouvelles, 6 étaient encore vivants sans récidive de la sténose, 3 décédés de leur pathologie, 1 perdu de vue.  .
Conclusion Il s’agit de la série la plus importante de sténoses digestives post-allogreffe de CSH. La sténose du grêle et du colon est une complication rare de GVH digestive sévère, à l’origine d’une morbidité importante. Le diagnostic peut être difficile. Le traitement est essentiellement chirurgical, mais peut être difficile chez ces patients fragiles.
 

Introduction – L’allogreffe de cellules souches hématopoïétiques (CSH) est une situation à haut risque d’aspergillose invasive (AI). Dans ce contexte, les performances de l’antigénémie (Ag) galactomannane pour le dépistage précoce et/ou le diagnostic d’AI sont largement décrites chez l’adulte. Les données pédiatriques sont rares et issues de cohortes hétérogènes. Notre objectif était d’évaluer les performances de l’Ag galactomannane pour le diagnostic de l’AI chez les enfants recevant une allogreffe de CSH.
Matériel et méthode – Nous avons rétrospectivement inclus tous les patients allogreffés de CSH, dans l’unité d’hémato-oncologie pédiatrique du CHU de Bordeaux, ayant eu au moins un épisode à risque d’AI entre janvier 2014 et octobre 2020. Ont été considérées à risque les périodes d’aplasie et/ou de réactions du greffon contre l’hôte (GVH) aiguës et durant lesquelles au moins deux dosages d’Ag galactomannane ont été réalisés. Ces Ag étaient prescrites systématiquement deux fois par semaine et sur point d’appel clinique. Ont été exclues les périodes à risque survenues chez les patients avec une antériorité d’AI et/ou une GVH chronique.  Les cas d’AI ont été classés prouvé, probable ou possible selon les critères de l’European Organization for Research and Treatment of Cancer/Mycoses Study Group (EORTC/MSG)1 à l’exception du seuil de positivité utilisé pour l’index de l’Ag Galactomannane (≥0,5).
Résultats – Au cours des 158 allogreffes de CSH (150 patients) réalisées sur la période de l’étude, 1333 Ag galactomannane ont été dosées et 167 périodes à risque identifiées. Quatre AI probables ont été diagnostiquées (incidence 2,4%) et 3 possibles. Les sensibilité, spécificité, valeurs prédictives positives et négatives de l’Ag galactomannane sont respectivement de 50%, 95,1%, 25% et 96,3% Chez ces patients, une Ag positive multiplie par 10 la probabilité d’AI (rapport de vraisemblance positif à 10,2) et une Ag négative la divise par 2 (rapport de vraisemblance négatif à 0,52). Sous prophylaxie antifongique adaptée (n=46 périodes à risque), aucune AI n’a été observée.
Discussion – A notre connaissance, il s’agit de la plus large cohorte pédiatrique d’allogreffe de CSH étudiant les performances de l’Ag galactomannane dans le diagnostic d’AI. L’incidence d’AI prouvée ou probable dans notre population est plus faible que celle rapportée dans la littérature et ce malgré l’existence dans notre étude de facteurs de risque environnementaux (travaux, déménagement). La réalisation des greffes de CSH en secteur à flux laminaire et l’utilisation d’une prophylaxie antifongique adaptée concernant plus d’un tiers des périodes à risque dans notre étude contribuent à réduire le risque d’AI. La diminution de l’incidence de l’AI chez les allogreffés de CSH se traduit par une baisse des performances de l’Ag galactomannane et notamment de sa VPP lors de son utilisation en dépistage systématique. Ces données sont cohérentes avec les recommandations en population adulte dans lesquelles le monitorage systématique de l’Ag galactomannane n’est plus recommandée en cas de prophylaxie antifongique adaptée.
Conclusion – Tout comme chez l’adulte, le dosage de l’Ag galactomannane ne devrait pas être réalisé de manière systématique chez le patient pédiatrique allogreffé recevant une prophylaxie antifongique adaptée mais devrait être réservé (en association avec la PCR Aspergillus) aux situations les plus à risque ou en cas de point d’appel clinique.

Figure 1. Diagramme de flux

Tableau 1. Caractéristiques des 150 patients

Tableau 2. Caractéristiques des 158 allogreffes

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Donnelly JP, Chen SC, Kauffman CA, et al. Revision and Update of the Consensus Definitions of Invasive Fungal Disease From the European Organization for Research and Treatment of Cancer and the Mycoses Study Group Education and Research Consortium. Clin Infect Dis. 2020;71(6):1367-1376.

Introduction / Objectif

Depuis 2014, les déclarations de biovigilance rapportant un faible rendement en cellules CD34 à la suite de la décongélation de greffon de cellules souches hématopoïétiques (CSH) autologues sont un des principaux types d'incidents déclarés. Dans le cadre de ses missions de vigilance, l’Agence de la biomédecine a donc mis en place une enquête nationale afin de mieux évaluer la fréquence de survenue de ces incidents.
L’objectif était de mettre en place une surveillance à la fois locale et nationale de ces incidents, afin de limiter le nombre de déclarations de biovigilance aux seuls cas où une augmentation de la fréquence des faibles rendements serait observée par les unités de thérapies cellulaires (UTC) ou en présence d'un effet indésirable associé. L’analyse au cas par cas de ces incidents ne permet que rarement l’identification d’une cause racine et de mesures correctives permettant de prévenir leur récurrence, alors que l’augmentation de leur fréquence de survenue pourrait être un signal de la dérive d’un process.

Matériel & Méthode

Pour cette enquête réalisée au cours de l’été 2020, l’ensemble des UTC de France ont été invitées à renseigner les éléments suivants, par année, entre 2015 et 2019, à l’aide d’un questionnaire en ligne envoyé par mail aux responsables des UTC :

• Le nombre de greffons de CD34+ autologues avec cryoconservation décongelés
• Le nombre de greffons de CD34+ autologues décongelés avec anomalie (rendement en CD34+ < 70% et quantité en CD34+ < 2.10⁶/kg patient après décongélation, critère issu du référentiel JACIE)
• Les critères utilisés pour évaluer la non-conformité des greffons, pour effectuer une déclaration de biovigilance ainsi que les difficultés éventuelles de communication avec équipes cliniques pour récupérer les dates de sorties d’aplasie des patients. 

Résultats

Sur 30 UTC interrogées, 28 ont complété et validé l’enquête, 2 avaient arrêté leur activité d’autogreffe. En moyenne pour l’ensemble de la période, 11,8% des greffons étaient concernés par un faible rendement.
Sur la figure 1, chaque point représente une UTC, avec en abscisse le nombre de greffons décongelés sur cette période et en ordonnée sa proportion de faibles rendements. Neuf équipes présentaient une proportion de faibles rendements significativement supérieure à la moyenne nationale. Il s’agit essentiellement d’équipes avec une activité modérée (moins de 750 greffons préparés sur la période).
Les critères de surveillance (quantité CD34, rendement CD34, viabilité CD34, viabilité CD45…) et leurs seuils conduisant à la réalisation d'une déclaration de biovigilance étaient différents selon les UTC.
Enfin, 16 UTC (57%) ne déclaraient aucune difficulté de communication avec les équipes cliniques pour récupérer les dates de sortie d’aplasie des patients greffés.

Discussion / conclusion

En plus de fixer un cadre harmonisé des critères de déclaration de biovigilance concernant les mauvais rendements en CD34, ce travail a permis d’obtenir une vision nationale et évolutive du nombre de ce type d'incident à la décongélation. Cette enquête a pour objet d'être reconduite annuellement et les données 2020 et 2021 seront être recueillies courant 2022. Ainsi cette surveillance, avec un retour régulier vers les UTC permettra une émission d’alertes auprès des centres qui le nécessitent, facilitant une analyse rapide de leur situation voire l'évaluation d’éventuelles mesures correctives misent en place.
 

Figure 1. Test statistique d’écart à la moyenne nationale : méthode du « funnel plot » des faibles rendements entre 2015 et 2019

Background: High dose melphalan (HDM) followed by autologous hematopoietic stem cell transplantation (ASCT) is widely used in newly diagnosed multiple myeloma patients as upfront therapy. However, the safety and efficacy of transplantation in patients with renal insufficiency is controversial. Here, we analyzed prospectively the outcomes of myeloma patients with severe renal insufficiency who underwent autologous transplantation.
Methods: We enrolled prospectively in 17 SFGM-TC centers, 50 newly diagnosed myeloma patients who had a serum CrCl of <40 mL/min at the time of transplantation. All patients received a bortezomib-based induction therapy and had achieved at least a partial response before proceeding to transplantation. The recommended dose of melphalan was 140 mg/m2 and it was infused at least 3 x106/kg autologous CD34+ cells. Consolidation/maintenance post-transplantation was achieved according to the physician’s choice. The primary endpoint was non-relapse mortality.
Results: At diagnosis, the median medullary plasmocytosis was 42% (11-80), light chain MM was frequent in 28 patients (56%), IgG in 13 (26%), IgA in 8 (16%) and 1 IgD. Seven (16%) had extra medullary disease. The ISS score was I (1), II (7) and III (34) (8 missing). At enrollment, at the time of ASCT, median age was 56 years (33-68), 82% were male. The HCT-CI score was 0 (4), 1 (8), 2 (11), 3 (11), 4 (1) missing (15) and 97% had a Karnofsky score ≥70%. Induction chemotherapies had included bortezomib plus IMiDs in 28 (56%) patients, CyBorDex in 17 (34%), bortezomib dex in 4 (8%) and 1 other (2%). Thirty-nine patients (80%) had received 4 or less cycles of chemotherapy and 13 (26%) had ≥2 lines of chemotherapy. The pre-transplant disease status was sCR in =3 (6%), CR in =7 (14%), VGPR in =22 (45%), and PR in =17 (35%) of patients (1 not evaluable). The number of days of cytapheresis was 2 or less in 93% of cases and the median number of CD34+ cells collected was 5.4 x 106 (1.1-15.1). HDM was 100 mg/m2 in 1, 140 mg/m2 in 44/50 patients and 200 mg/m2 in 5/50 with 6 patients receiving a tandem ASCT. Seventy three percent received consolidation post ASCT and 69% had maintenance therapy (lenalidomide: 53%, thalidomide: 26%, bortezomib: 21%). The median time to neutrophil engraftment was 13 days and to platelet engraftment 16 days. Among patients receiving RBC transfusions (43%) and platelet transfusions (49%), the median number of RBC transfusions was 3 (2-14) and that of platelet transfusions was 2 (1-44). We observed one death during the first 100 days post-transplantation, secondary to a septic shock on day 42, and at 2 years, the non-relapse mortality was 4% (95% CI: 0%-12%). At 100 days post-transplantation, the hematological response had improved in 62 % of patients, from PR to VGPR (15%), from PR to CR/sCR (15%), from VGPR to CR/sCR (30%) and from CR to sCR (2%). At 2 years, the overall survival was 84% (95% CI: 74%-95%), the progression-free survival was 70% (95% CI: 58%-84%) and the cumulative incidence of relapse was 30 % (95% CI: 17%-43%). Nine patients (60%) achieved dialysis independence from the time of diagnosis: 15 patients were on dialysis at diagnosis, 6 at the time of ASCT and 4 three months post-ASCT.
Conclusions: Autologous transplantation proved to be safe and effective in myeloma patients with renal insufficiency at transplantation. Non-relapse mortality was 4% at 2 years and 62% improved their hematological response.

Follow-up after autologous stem cells

Introduction : Hepatitis B virus reactivation is a well established complication of severe immunosuppression in patients with hematologic malignancy. Little information is available regarding patients with multiple myeloma (MM).
Patients and methods : we report two cases of two patients diagnosed and treated for multiple myeloma in the hematology department at Aziza Othmana Hospital between 2019 and 2021. Both patients had an autologous hematopoetic stem cell transplantation (AHSCT).
Results :
Case 1 : A 54 -year -old woman was diagnosed with a kappa light chain MM stage IIIB, in 2019. At diagnosis, the liver check-up was normal ; Hepatitis B serology showed a negative HBs Ag. Anti HBs and anti HBc were not investigated. She received 4 courses of VTD chemotherapy (velcade, thalidomide and dexamethasone). She had a very good partial response (VGPR) post chemotherapy and AHSCT. She maintained a complete remission at 3 months post transplant. However, she died at 6 months post transplant with fulminant hepatic failure. The clinical evolution was rapid and brutal.
Case 2 : A 65 -year-old woman was diagnosed with IgG Kappa MM stage IIB in 2019. At diagnosis, the liver check-up was normal ; Hepatitis B serology showed a resolved infection profil. She received 4 courses of VTD. She had a VGPR post chemotherapy and AHSCT in 2021 without major copmlications.She maintained a complete remission at 3 months post transplant ; At 6 months , she had elevated aminotransferases ( ten times the normal value) with jaundice and abdominal pain .She was referred immediately to a gastroenterology clinic.The acute hepatitis B was controlled, however, she died of nosocomial pneumonia.
Discussion and Conclusion :
The first patient hadn’t a complete serological profile, but due to HBV reactivation and the incidence of hepatitis B in Tunisia, she had probably a resolved infection at diagnosis. Both patients did not receive a prophylactic preemptive treatment.HBV reactivation was due probably to multiple risk factors, apart from the serological profile, as immunosuppression by AHSCT, Bortezomib and the use of steroids of long time period.
 HBV complete testing must be a common practise before chemotherapy in patients with hematologic malignancies. Prophylactic premptive treatment is the key for patients with resolved infection to reduce mortality from HBV reactivation and ranges the clinical spectrum to asymptomatic infection.

Introduction :
L’autogreffe de cellules souches hématopoïétiques (auto-CSH) après intensification par Melphalan (Mel) est une option thérapeutique majeure dans le traitement des patients (pts) atteints de myélome multiple (MM). L'expression de CD34 sur les cellules progénitrices hématopoïétiques est utilisée pour évaluer la teneur en cellules souches des greffons.
Objectifs: :
Le but de cette étude est d’évaluer la relation entre le nombre de cellules CD34+ infusées et la durée de la prise de greffe de polynucléaires de neutrophiles (PNN) et des plaquettes (plQ).
Matériel et méthodes :
Il s’agit d’une étude rétrospective qui a colligé 304 pts atteints de MM ayant subi une auto-CSH entre 2009 et 2019 dans un seul établissement.  La mobilisation de CSH a été faite par G-CSF seul (filigrastim ou lenogrsatim) à raison 15 ug/Kg chez 112 pts, et 10 ug/kg chez 192 pts. La cytaphérèse a été réalisée par un séparateur de cellules type (Comthec Optia ® et fresenius ®). Tous les pts ont reçu un conditionnement à base Mel 200 mg/m³. La prise de greffe était définie par un taux de PNN >0.5 G/L deux jours consécutifs, et un taux de plQ > 20 G/L sans transfusion plQ pendant 7 jours consécutifs. Aucun pt n’a reçu de G-CSF pendant la phase d’aplasie. Les pts ont été divisés en 3 groupes (G) selon le seuil de cellules CD34+ réinjectées ; G1 (n°= 78) : CD34+ < 2,5 x 10⁶, G2 (n°= 174) : CD34+ ≥ 2,5 et < 5 x 10⁶, G3 (n°= 52): CD 34+ ≥ 5 x 10⁶.  La date d’évaluation de l’étude était le 31/12/2019.
Résultats :
Au total 304 pts ont été inclus dans cette étude, dont 181 hommes et 123 femmes (sex-ratio H/F = 1.47). L’âge médian à la greffe était de 53 ans (27- 67 ans). Le nombre médian de cytaphérèses était de 1 (1-3). Le nombre médian de cellules CD 34+/kg injectées était de 3.86 x 10⁶ (1.22-13.62). Le nombre médian de jour pour que le taux de PNN >0.5 G/L : 10 jours (6-22 jours) et pour que les plQ > 20 G/L= 12 (3-140 jours).  La durée d’aplasie pour le G1, G2, G3 était de 9 jours (6-22), 10 jours (6-25) et 9 jours (6-19) (p=0.31) respectivement. La récupération de plQ pour le G1, G2, G3 était de 12 jours (3-56), 11 jours (6-140) (0.15) et 11 jours (4-14) (p= 0.0023) respectivement. Le TRM à jour 100 était de 4% pour le G1, 0.5 % pour le G2 et 0% pour le G3 (P= 0.15).
Conclusion :  
La durée de la récupération plaquettaire après auto-CSH non cryopréservées est plus courte avec un greffon de richesse cellulaire CD 34+ ≥ 5 x 10⁶/kg chez pts atteints de MM.

 

Introduction : Le myélome multiple (MM) est une hémopathie maligne touchant les sujets au-delà de la 6^ème décade habituellement. L’un des progrès notables dans le traitement du MM est l’autogreffe de cellules souches hématopoïétiques (auto-CSH) mais dont l’obstacle majeur fut l’âge moins de 65 ans, en raison des risques de comorbidité liés à la procédure. Actuellement, les progrès de la réanimation hématologique à permis de reculer l’âge des patients (pts) pour l’éligibilité à l’auto-CSH.
Nous rapportons dans ce travail, nos résultats dans la prise en charge de patients (pts) âgés de 65 ans et plus et ayant subi une auto-CSH dans le service.
Patients et Méthodes :
Il s’agit d’une étude rétrospective, longitudinale, descriptive, portant chez les sujets âgés de de 65 ans et plus et éligibles à une auto-CSH. Les données relevées à partir des dossiers des patients, ont porté sur les caractères anthropologiques, cliniques, biologiques, thérapeutiques et de survie. L’évaluation des survies sans progression et globale ont été calculées selon la méthode de Kaplan-Meier. La date de point est le 30/08/2022.
Résultats :
Sur une période allant de 2009 à 2020, nous avons colligés 475 pts ayant subi une auto-CSH dont 40 pts étaient âgés de 65 ans et plus. L’âge médian au diagnostic était de 66.2 ans (65-78 ans), dont H/F= 22/18 avec un sex- ratio=1.2. Le PS 0-1 au diagnostic était de 24 pts, ≥2 chez 13 pts et non évaluables chez 3 pts. En termes de comorbidités, le score de CIRS n’a pas été calculé, mais nous avons relevé : 6 cas de diabète, 13 cas d’HTA, 5 cas de diabète+HTA, et 15 pts n’ont pas présenté de comorbidités. Le stade pronostic Salmon-Durié était comme suit : IIA chez 2 pts et III chez 36 pts dont IIIB chez 6 pts, non évaluables chez 2 pts. Le score ISS était le suivant : ISS1=8pts, ISS2=9 pts et ISS3=7 pts, NE=16pts. Le taux de créatininémie>20 mg/l chez 6 pts avec une clearance moyenne=19.2ml/mn. Le taux d’Hb moyen=9.5g/dl (6-12 g/dl). Du point de vue thérapeutique, les protocoles utilisés en induction étaient les suivants : VCD chez 10pts, VTD chez 16pts, VD chez 5pts, VAD chez 4pts et autres chez 5pts. L’évaluation post induction a montré : Echecs=2, RP=9, TBRP=18, RC=2 et NE=2.
A l’auto-CSH : le nombre médian de cytaphérèse=1 (1-3), le taux de CD34+=2.68 (1.33-9.10), le conditionnement a porté sur le Mel140 chez 16pts et Mel200 chez 24 pts. La toxicité hématologique était présente chez tous les pts avec une durée d’aplasie moyenne de 9 jours (6-26 jours). Le nombre moyen de CGR=2 (0-4) et le nombre moyen de CUP=2 (0-7). La mucite de grade 0-1 chez 26 pts et >2 chez14pts. A J100, l’évaluation a montré 28 RC, 10 TBRP et 2 décès (TRM ; choc septique) liés à la procédure. La consolidation post auto-CSH a été réalisée chez 23 pts et le traitement d’entretien post auto-CSH à base de thalidomide 50 mg/j pendant 21 jours tous les 28 jours chez 30 pts. A la date de point du 30/8/2022, 13 pts (34%) ont présenté une rechute post-AG. En termes de survies, la médiane de SSE était de 97 mois (Fig1) et la SG à 5 ans de 70% (Fig2).
Conclusion :
Sur une période de 12 ans, et parmi 475 auto-CSH, près de 9% (40 pts) étaient âgés de 65 ans et plus. Les résultats obtenus en termes de TRM (2pts), de toxicité (mucite 65% grade 0-1), de réponse (92% de réponse globale), de taux de rechute (34%) sont très satisfaisants ainsi que ceux des SSE et de SG. Ceci nous incite à poursuivre l’inclusion à l’'auto-CSH des pts âgés de plus de 65 ans.
 

Survie sans progression MM sujets âgés > 65 ans éligibles à l'auto-CSH

Survie globale MM sujets âgés > 65 ans éligibles à l'auto-CSH

Introduction : Dans notre service, depuis Janvier 2019, le traitement du Myélome Multiple (MM) chez le sujet jeune est basé sur une cure d’induction suivie d’une intensification thérapeutique puis une autogreffe de cellules souches hématopoïétiques (ACSH) non cryopréservées. Nous avons colligés 73 ayant obtenus une réponse complète (RC), très bonne réponse partielle (VGPR) ou réponse partielle (RP) bénéficiant d’une ACSH non cryopréservées.
 
Matériel et méthode: Etude rétrospective allant de Janvier 2019 à juillet 2022. Soixante triez patients ont bénéficié d’ACSH: 45 hommes et 28 femmes avec un sex ratio de 1.6 et un âge médian de 54.7ans (33-69).  Les patients sont classés en stade IIIA : 66 cas (90.5%) et IIIB: 7 cas (9.5%) selon la classification de Salmon et Durie. L’induction a été VTD: 55 cas, VCD: 16cas et VRD: 2cas, soldée par une RC: 19 cas (26%), VGPR: 35 cas (48%) et RP: 19 cas (26%)  selon les critères IMWG. La mobilisation faite par le GCSF à la dose de 15ug/kg/j puis collecte du greffon sur une Spectra Optia®. Les greffons ont été conservés à 4°c dans un réfrigérateur. Le conditionnement est basé sur du Melphalan à 200mg/m2 à J-1 en cas d’un bilan rénal normal et à 140 mg en cas d’insuffisance rénal. Le dénombrement des CSH CD34+ a été fait sur un cytomètre 04 couleurs BD Calibur. La consolidation à J60 et l’évaluation à J100 postautogreffe
 
Résultats: La durée de mobilisation est de 4 jours: 60 cas (82.2%), et de 5 jours:13 cas (17.8%), donc 2 aphérèses. La richesse médiane du greffon en CSH est de 7.78x106 CD34+/kg (2.17-30). L’intervalle médian pour la récupération des neutrophiles=8.8 jours (6-14). Le nadir moyen des globules blancs est de 66 ets/µl (0-400). Soixante deuze patients ont présenté des besoins transfusionnels avec une médiane de 2.87 des CUP (1-17), par contre la transfusion des culots globulaires a été effectuée chez 23 patients avec une médian de 2 de culots globulaires (1-7). La durée moyenne d’hospitalisation est de 18.3 jours (13-37). Dans notre étude, on n’a pas eu d’échec de greffe ni de décès. Aucun patient n’a présenté d’in­cident au cours de la réinjection.L’évaluation à J100 d’AG: les 19 RC sont toujours en RC, les 35 VGPR (RC: 13, VGPR:13 et en cours: 9 cas) et en RP : 19 cas  (RC:8, VGPR:7 et RP:4). Devenir: 66 vivants, un PDV et 6 décèdes dans 3 par la covid19. Onze cas ont rechute (RC:6, RP:1 et VGPR:4) avec un délai médian de rechute: 27.9 mois (6-168)
 
Discussion: Nos données rejoignent les données de la littérature comme l’étude de l’Urueta qui a analysée 216 MM avec prédominance masculine et un âge médian de 54 ans (29-75). L'intervalle médian des neutrophiles est 14 jours. Il déplore 3 décès. Des études menées en Inde, en Maroc et en Algérie montrent des caractéris­tiques de patients et des résultats similaires à notre étude. Plusieurs études comme celle de Wanesson et de Jaime, soutiennent l'efficacité des ACSH non cryopréservées.
 
Conclusion: L’Autogreffe Non Cryopréservées est une alternative pour assurer une prise en charge des patients jeunes atteints de MM. Cette technique est moins complexe et moins couteuse que la cryopréservation avec des résultats équivalents. La conservation des greffons à +4°c est parfaitement faisable afin de maintenir leur viabilité jusqu’ à leur réinjection. Cependant, l’inconvénient est l’incapacité à conserver une partie du greffon pour une deu­xième greffe
 

Introduction
La numération des cellules nucléées totales du greffon (ioTNC) lors du prélèvement de moelle est systématiquement réalisée même si l’obtention du résultat, son utilité et son interprétation sont complexes. Cette étape est cruciale dans la gestion du prélèvement, afin d’optimiser la quantité de cellules collectées tout en limitant le temps de prélèvement et les complications du donneur. L’objectif est de démontrer pour la première fois l’hémodilution progressive du prélèvement et de déchiffrer son interprétation.
 
Matériel et méthodes
83 moelles osseuses de l’hôpital Saint-Louis depuis 2017 ont été analysées. Le prélèvement est fait avec un trocart multi-perforé, avec exploration médullaire progressive en épines iliaques postérieures et avec des volumes <5 ml. Les informations collectées sont l’âge, la taille et le poids du donneur, l’âge et le poids du receveur, la sortie d’aplasie, et les caractéristiques du greffon. Nous avons secondairement réalisé une étude prospective de 11 prélèvements avec une analyse séquentielle de la concentration médullaire tous les 500 ml.
 
Résultats
L’analyse multivariée des facteurs collectés montre un impact du volume de prélèvement et de l’ioTNC (Fig. 1A, B et D). L’ioTNC est corrélée à la concentration médullaire finale, mais elle est strictement inférieure (Fig. 1C). L’analyse des prélèvements à l’objectif montre un comportement linéaire avec le volume de prélèvement rapporté au donneur (Fig. 2A), selon la formule : Volume de prélèvement / poids du receveur = 35 – 0.55 ioTNC. La comparaison de ce prélèvement au prélèvement théorique (Fig. 2B) montre une différence importante, jusqu’à 8 ml/kg de receveur de différence. Cette différence vient de l’interprétation de la numération par le clinicien, anticipant l’hémodilution (Fig. 3A). L’hémodilution est proportionnelle au volume de prélèvement, et progressive au cours de celle-ci (Fig. 3B, C).
 
Discussion
L’analyse multivariée confirme l’importance de l’ioTNC dans la prédiction du prélèvement médullaire, et son utilité malgré les contingences matérielles qui l’entourent. Le prélèvement et l’interprétation de l’ioTNC nécessitent une expérience clinique (Remberger et al., 2015). Elle ne devrait pas être directe, mais suivre un modèle anticipant l’hémodilution. Les modèles précédents (Batinic et al., 1990) proposent une hémodilution stable et dépendante de la méthode de prélèvement, alors que nous mettons en avant une hémodilution progressive, avec un impact mineur d’une 4e poche dans le résultat global.
Nos résultats remettent en cause l’apport cellulaire de cette 4e poche sur la sortie d’aplasie (Fig. 3D), et posent avec notre modèle de prélèvement la question d’une limite supérieure à 1500ml en intégrant l’objectif du volume / kg de receveur.
 
Conclusion
L’analyse de l’ioTNC confirme son importance et montre une interprétation anticipant l’hémodilution du prélèvement pour optimiser la quantité de cellules tout en limitant les complications donneurs.

Figure 1

Figure 2

Figure 3

Bibliographie
1. Remberger, M., Ringdén, O. & Mattsson, J. Bone marrow aspiration technique has deteriorated in recent years. Bone Marrow Transplant. 50, 1007–1009 (2015).
2. Batini?, D. et al. Relationship between differing volumes of bone marrow aspirates and their cellular composition. Bone Marrow Transplant. 6, 103–7 (1990).

Introduction/Objectifs. L’immunosélection CD34+ est utilisée pour le traitement des cytopénies sévères persistantes post-allogreffe. La sélection magnétique est communément réalisée sur CliniMACS Plus (Miltenyi Biotec). Toutefois, l’efficacité du procédé dépend aussi des étapes intermédiaires de préparation des cellules prélevées par aphérèse. L’objectif de ce travail a été de valider la réalisation des étapes de déplaquettisation, immunomarquage et lavages sur l’automate LOVO® (Fresenius) en remplacement de la méthode par centrifugation.
Matériels & Méthodes. L’analyse porte sur 3 pools de cellules mononuclées périphériques issues de résidus d’aphérèse de patients mobilisés ou non. Chaque pool a été séparé en 2 : 1 poche LOVO® et 1 poche centrifugation.
Les contrôles de qualité ont été réalisés sur échantillon pré et post-manipulation. Les cellules nucléées totales (CNT) et les plaquettes ont été quantifiées sur compteur XN-350. Les rendements ont été calculés à partir des quantités de cellules CD34+ et CD45+ viables, mesurées par cytométrie en flux (Navios, Beckman Coulter) après immunomarquage CD34+/CD45+ et ajout du 7-AAD (marqueur de viabilité).
Un t-test (bilatéral, sur séries appariées) a été réalisé pour analyser les différences entre les 2 méthodes. Une comparaison entre le LOVO® et une cohorte historique (2021-2022) d’immunosélections de CSP allogéniques (n=13) a également été effectuée (t-test bilatéral, sur séries non appariées).
Résultats. Lors de la comparaison des 2 méthodes à partir d’un même échantillon, les viabilités cellulaires obtenues ont été respectivement de 97,9% ±0,5 sur LOVO® et de 97,7% ± 1,4 après centrifugation pour les CD45+, et de 98,3% ±0,4 et 98,3% ±1,5 pour les CD34+. Les rendements en CNT ont été respectivement de 88,2% ±3,6 (LOVO®) et de 86,7% ±1,4 (centrifugation), et les rendements en cellules CD34+ ont été de 79,9% ±10,1 et de 73,2% ±31,6. La déplétion plaquettaire était de 95,2% ±2,3 (LOVO®) et de 55,7% ±10,3 (centrifugation). Aucune différence significative n’a été mise en évidence entre les 2 méthodes concernant la viabilité des cellules CD45+ (p=0,74) et CD34+ (p=0,99), les rendements en CNT (p=0,50) et en CD34+ (p=0,55). En revanche, une différence significative a été observée pour la déplétion plaquettaire (p=0,008).
Les résultats obtenus sur LOVO® ont ensuite été comparés aux données historiques. Dans cette cohorte, les viabilités cellulaires étaient de 98,8% ±0,5 pour les CD45+ et de 98,7% ±1,5 pour les CD34+. Le rendement des CNT était de 86,0% ±5,9 et celui des CD34+ de 86,8% ±9,5. La déplétion plaquettaire était de 42,9% ±27,7. Aucune différence significative n’a été mise en évidence concernant la viabilité des cellules CD34+ (p=0,30), les rendements en CNT (p=0,51) et en CD34+ (p=0,24). En revanche, une différence significative pour la viabilité des cellules CD45+ (p=0,02) a été observée, de même que pour la déplétion plaquettaire (p=0,004).
Discussion. Le LOVO® obtient une viabilité cellulaire et un rendement CD34+ au moins équivalent à la méthode par centrifugation pour le produit intermédiaire. Cette méthode automatisée semble améliorer la déplétion plaquettaire. L’impact de ces résultats sur l’ensemble du processus d’immunosélection et sur la pureté des cellules CD34+ est à évaluer.
Conclusion. Le LOVO® permet la réalisation automatisée et en système clos des étapes de déplaquettisation et d’immunomarquage des produits d’aphérèse dans le cadre d’un procédé d’immunosélection CD34+.

Introduction/Purpose: In the UK, CPX-351 (Vyxeos® liposomal) has been licensed since 08/2018 for adults with newly diagnosed, therapy-related AML (t-AML) or AML with myelodysplasia-related changes (AML-MRC) based on favourable outcomes for CPX-351 vs 7+3 chemotherapy in a phase 3 trial in adults 60–75 y with newly diagnosed, high-risk/secondary AML. However, the phase 3 trial did not reflect the full licensed population. CREST-UK was performed to assess the effectiveness and safety of CPX-351 in routine UK practice and observe the impact of COVID-19 infection in these patients (pts).
 
Material & Method: CREST-UK is a retrospective, noninterventional, multicentre, observational study (NCT05169307) that collected pseudonymised data from the medical records of adults ≥18 y with newly diagnosed t-AML or AML-MRC (per WHO 2016 criteria) who received ≥1 CPX-351 infusion in routine practice.
 
Results: A total of 147 pts who received their first CPX-351 induction from 11/2018 to 03/2022 were included from 15 centres. Median age was 64 y (range: 18, 83), with 12% aged <45 y, 27% aged 45–59 y, 44% aged 60–69 y, and 18% aged ≥70 y. Overall, 24% had t-AML and 76% had AML-MRC; 9% had received prior azacitidine. Most (90%) pts had an ECOG PS ≤1. Disease risk by European LeukemiaNet 2017 criteria was favourable for 9%, intermediate for 27%, adverse for 45%, and unknown for 20% due to limited mutation data. Complex karyotype, monosomal karyotype, and/or abn(17p) were reported for 25%. TP53 mutations were reported for 15/66 (23%) pts with evaluable data.
 
A best response of CR+CRi was achieved by 73/138 (53%) evaluable pts, and CR+CRi+MLFS+PR was achieved by 88/138 (64%) pts. Post induction, 19/37 (51%) pts in CR/CRi with a known measurable residual disease (MRD) status achieved MRD negativity; 3 additional pts achieved MRD negativity at a later time point. With a median follow-up of 10.6 mo (interquartile range [IQR]: 4.5, 18.4), Kaplan-Meier median OS was 12.85 mo (95% CI: 9.2, 15.4; Fig 1); 2- and 3-y OS estimates were 36% and 34%. Fifty (34%) pts underwent haematopoietic cell transplantation (HCT); median OS landmarked from HCT date was not reached (Fig 2), with a 2-y OS estimate of 71%.
 
Among pts in CR/CRi, median recovery (IQR) to neutrophils ≥500/μL was 33 d (28, 43) and to platelets ≥50,000/μL was 34 d (27, 48) during the 1st induction. Grade ≥3 treatment-related AEs (TRAEs) of interest included febrile neutropenia (36%; n=1 grade 5), infections (29%; n=6 grade 5), bleeding (4%; n=1 grade 5), and gastrointestinal events (3%). Cardiac TRAEs of any grade were reported for 5% (3% grade ≥3; n=1 grade 5). Estimated all-cause mortality was 7% at 30 d and 14% at 60 d.
 
A total of 26 COVID-19 infections happened at variable time intervals pre- or post-AML treatment; 2 deaths were directly linked to COVID-19, both assessed by the investigator as unrelated to CPX-351.
 
Discussion: CREST-UK, a real-world study in the context of the COVID-19 pandemic, confirmed the efficacy and safety of CPX-351 in a broad population that included substantial proportions who were aged <60 y or ≥70 y and/or had adverse-risk disease. Survival outcomes and proportions achieving CR/CRi with MRD negativity and/or proceeding to HCT were consistent with other real-world studies. No new safety concerns were identified.
 
Conclusion: These data provide new insights into the use of CPX-351 in routine UK practice and support its continued use in adults with newly diagnosed t-AML and AML-MRC.

• Introduction/Objectif

Jusqu’en juillet 2019, le prélèvement de moelle osseuse (PMO) à l’IUCT de Toulouse s’est effectué à l’aide d’une poche de recueil de moelle de 500ml contenant 50ml d’ACDA (MSE0100Q ; MACOPHARMA). En raison d’un arrêt de commercialisation de ce dispositif par le fabricant, le laboratoire de thérapie cellulaire a initié un changement et prospecté différentes solutions d’approvisionnement. Une analyse d’impact a mis en exergue des risques aseptiques pour les références en système ouvert (malgré le marquage CE à cet usage) ou des risques d’erreur humaine et de désorganisation au bloc opératoire pour le personnel en charge du prélèvement. Pour minimiser l’impact, la solution retenue a été de préparer le kit PMO en thérapie cellulaire en ajoutant l’ACD dans une poche de recueil sèche de 600ml en PVC-DEHP (R6R2024 ; FRESENIUS) complétée d’un prolongateur 7cm avec robinet 3 voies fermé sur l’embout luer lock (394945 ; BD) en salle blanche Classe D et sous PSM. La poche ainsi préparée, est ensuite reconditionnée en double emballage stérile (accompagné de clamps stériles) pour pouvoir être acheminée au bloc opératoire.
Le but de ce travail est de présenter les étapes de validation de la préparation de ce kit PMO et l’impact sur la qualité des produits prélevés depuis sa mise en place en Août 2019.

• Matériel & Méthode

Plusieurs préparations ont été mises en œuvre pour valider chacune des étapes suivantes :

• Résultats

Les contrôles microbiologiques des kits préparés étaient tous conformes même 4 jours après la préparation permettant ainsi de définir une péremption.
Aucun impact négatif n’a été détecté: les viabilités après filtration sont en moyenne supérieures (96.12% vs 93,66% avec une différence significative), les rendements en GB et CD34 après concentration vs réception sont équivalents (Rdt GB : 91.5% vs 91.6%, Rdt CD34+ 97,87% vs 95,74%, avec une différence non significative), les contaminations ont diminué (8%  avec n=1 vs 33% avec n=5) et sont de même nature (Cutibacterium acnes, flore anaérobie dans 100% des cas). Enfin, aucune matériovigilance n’a été enregistrée.

• Discussion/Conclusion

La préparation d’un kit PMO a été mise en place par l’utilisation d’une poche de transfert 600 ml (sèche) avec marquage CE pour le sang ou composants sanguins. La préparation a été procédurée et validée. Les résultats obtenus depuis 2019 montrent l’absence de dégradation de la qualité du prélèvement par rapport à l’ancienne référence ainsi qu’une bonne maîtrise des risques.
Cette mise en œuvre est toutefois limitée par l’utilisation d’une référence qui contient du DEHP. Considérant la mise en conformité obligatoire avec la réglementation DMDIV, des démarches sont en cours par le fabricant d’ici à Mai 2024 pour modifier les composants de cette référence, ce qui remettra en question la méthode et nécessitera une nouvelle validation.

Introduction: Veno-occlusive disease/sinusoidal obstruction syndrome (VOD/SOS) is a potentially fatal complication of haematopoietic cell transplantation (HCT). Defibrotide is approved for the treatment of severe hepatic VOD/SOS post-HCT in patients (pts) aged >1 month in the EU. Outcomes from 2 real-world observational studies were pooled for analysis of time to diagnosis, treatment duration, and VOD/SOS resolution in pts treated with defibrotide for severe/non-severe VOD/SOS post-HCT.
 
Methods: The DEFIFrance study collected retrospective/prospective data on pts receiving defibrotide at 53 French HCT centres from July 2014 to March 2020. VOD/SOS severity was categorised retrospectively/prospectively using adult EBMT criteria in pts aged ≥18 years, and in pts aged <18 years using paediatric EBMT criteria. EBMT PASS was a multinational, prospective study that enrolled defibrotide-treated pts from April 2015 to July 2018; investigators graded VOD/SOS severity based on clinical expertise. Investigators in both registries diagnosed VOD/SOS using classical/standard criteria. Since VOD/SOS grading was performed differently in the 2 registries, for this pooled analysis, mild/moderate and severe/very severe cases in DEFIFrance were combined with non-severe and severe cases in EBMT PASS, respectively.
 
Results: Overall, 414 defibrotide-treated pts with VOD/SOS post-HCT were included (336 from DEFIFrance and 78 from EBMT PASS). The median (range) time from HCT to VOD/SOS diagnosis was 13 (IQR: 8, 21) and 14 (IQR: 8, 22) days in pts with severe and non-severe VOD/SOS, respectively. 301/414 (73%) pts had resolution of VOD/SOS. Among pts with severe and non-severe VOD/SOS, respectively, 208/302 (69%) and 91/108 (84%) had VOD/SOS resolution; 2 pts in each category had missing severity data. Median time from start of defibrotide to VOD/SOS resolution was 20 days (range: 3, 110) in pts with severe VOD/SOS and 15 days (range: 1, 147) in pts with non-severe VOD/SOS. Median treatment duration among pts with severe and non-severe VOD/SOS was 16.5 days (range: 1, 258) and 16 days (range: 3, 73), respectively. Among pts with VOD/SOS resolution, symptoms resolved after Day 21 in 36% of pts with severe VOD/SOS and 23% of pts with non-severe VOD/SOS. KM-estimated survival at Day 100 post-HCT among pts with severe VOD/SOS was 84% (95% CI: 78%, 88%) in those with VOD/SOS resolution and 14% (95% CI: 8%, 22%) in those without; among pts with non-severe VOD/SOS, this was 94% (95% CI: 87%, 98%) and 35% (95% CI: 15%, 57%), respectively.
 
Serious treatment-emergent adverse events (TEAEs) of interest occurred in 25% of pts with VOD/SOS resolution. In pts treated for ≤21 days and >21 days, respectively, the most common serious TEAEs of interest by category were infection (14% and 15%) and haemorrhage (12% and 13%). Among pts with VOD/SOS resolution, the most common causes of death were infection (severe: 11%; non-severe: 2%) and GvHD (severe: 6%; non-severe: 2%).
 
Conclusion: Time to VOD/SOS resolution tended to be longer in pts with severe vs non-severe disease, with a substantial proportion requiring >21 days of therapy to achieve resolution. Day 100 survival was higher in pts with VOD/SOS resolution vs without, regardless of severity, highlighting the importance of obtaining resolution of VOD/SOS symptoms. Defibrotide safety in the real-world setting was consistent with reports from previous studies, supporting the utility of defibrotide in VOD/SOS treatment.

Introduction :
Les commercialisations de toutes les poches disposant d’un marquage CE pour le recueil de la moelle osseuse ont successivement été interrompues en 2021. Au CHU de Bordeaux, le stock de ces poches étant épuisé au 30 juin 2022, une solution devait être proposée pour pallier l’absence d’alternative de dispositif médical à usage unique marqué pour cette activité.
 
Matériel et méthode :
Le laboratoire d’ingénierie tissulaire et cellulaire (ITC) a proposé de tester les poches de transfert Macopharma de 600mL (ref VSE 4001XA), ayant un marquage CE pour le recueil et la conservation de sang ou de ses composants, et déjà utilisées pour la préparation des produits cellulaires. Elles présentent deux sites d’échantillonnage et une longue tubulure munie d’un spike. Après discussion avec les infirmier(es) coordinateur/trices des équipes adultes et pédiatriques de greffe de cellules souches hématopoïétiques, un protocole est défini : les injections et prélèvements dans la poche se font à la seringue sans aiguille via l’un des sites, auquel on adapte un spike (B/Braun 413501) muni d’une valve à deux voies SAFSITE® et qui peut être fermée à l’aide d’un connecteur de type Luer Lock (bouchon vissant). L’injection directe du produit cellulaire dans la poche évite a priori la coagulation, la perte de volume et de viabilité cellulaire qui pourraient être observés avec une injection faite via une longue tubulure. La valve assure la stérilité et l’absence d’écoulement vers l’extérieur.
 
Les opérations sont les suivantes :
Au bloc :
Obturation distale de la tubulure (près de son spike) à l’aide d’un clamp de Bahr
Insertion dans un site d’échantillonnage du spike B/Braun anti retour
Anticoagulation de la poche par injection à la seringue du mélange d’ACD-A/héparine sodique
Prélèvement de la moelle sur le donneur
Injection de la moelle dans la poche
Échantillonnage de la poche à la seringue en cours de procédure pour contrôle de la richesse cellulaire in process.
En fin de prélèvement, rajout du bouchon vissant
Transport à plat en mallette dans une surpoche vers l’ITC
 
Au laboratoire d’ITC :
Soudure proximale de la tubulure
Insertion du dispositif de filtration de la moelle via son spike dans le deuxième site
Filtration de chaque poche, poolage dans une poche de transfert
Échantillonnage du pool, etc…
 
Résultats:
Deux prélèvements (dont un en pédiatrie) ont pu être réalisés. Aucun incident n’a été observé durant le prélèvement ni en cours de manipulation en ITC.
 
Discussion
Le volume relativement faible de ces poches au regard de celui des prélèvements médullaires ne semble pas être un frein pour les préleveurs. Au contraire les premiers volumes d’échantillon injectés seront dilués dans un volume d’anticoagulant plus faible, impactant a priori moins la viabilité.
En cas d’impossibilité d’utiliser le site d’échantillonnage muni du spike anti retour (par coagulation par exemple), on peut continuer l’injection de moelle via le deuxième site. Dans ce cas, la filtration peut toujours s’effectuer par connexion stérile via la tubulure clampée distalement qui sera alors non soudée à réception.
 
Conclusion : le retour d’expérience positif de ces prélèvements va participer à la validation de la procédure de prélèvement de moelle qui sera soumise aux autorités sanitaires.

Introduction/ Objectif
Les LAM en rechutes post-allogreffe de cellules souches hématopoïétiques sont marquées par un pronostic sombre et justifient le développement de nouveaux traitements.
L’isocitrate deshydrogenase de type 1 (IDH1) est une enzyme, dont les mutations sont retrouvées dans environ 6-10% des LAM, et est la cible du traitement par ivosidenib. En France, l’ivosidenib bénéficie d’une demande d’autorisation d’accès compassionnel.
Dans les LAM R/R, l’ivosidenib a montré des taux de réponse globale de l’ordre de 41,6%.
L’intérêt de cibler la protéine IDH1 dans les rechutes de LAM post-allogreffe n’a jamais été évalué dans la littérature scientifique.
 
Matériel & Méthode 
Nous avons mené une étude rétrospective multicentrique, en collaboration avec la Société Française de Greffe de Moelle et de Thérapie Cellulaire (SFGM-TC), ayant concerné 22 patients de 13 centres français et nous nous sommes intéressés à évaluer l’efficacité et la sécurité de l’ivosidenib dans les rechutes d’hémopathies myéloïdes IDH1+ post-allogreffe de cellules souches hématopoïétiques. Nous avons évalué le taux de réponse complète, le taux de réponse complète avec récupération hématopoïétique incomplète (RCi) ainsi qu’à la survie globale, la survie sans évènement (définit comme l’arrêt de l’ivosidenib pour toxicité, échec ou décès) des patients.
 
Résultats 
Les caractéristiques des 22 patients sont : âge médian 47 ans, 15 hommes et 7 femmes ; 15 patients étaient en première rémission complète ; 16 patients présentaient un caryotype normal ; l’anomalie moléculaire la plus fréquemment associée était la mutation NPM1.
La source du greffon étaient les cellules souches périphériques pour 19 patients ; 50% de patients ont reçu une greffe phéno-identique ; le conditionnement était non myélo-ablatif pour 64% des patients ; 68% de patients n’ont pas manifesté de GVH.
Le délai médian d’introduction de l’ivosidenib est de 4,9 mois ; 14 patients ont reçu l’ivosidenib dans les 3 mois suivant leur rechute et 7 patients au-delà de 3 mois ; l’association à d’autres traitements à visé hématologique n’était renseignée que pour 3 patients, elle ne peut donc pas être analysée.
Le taux de réponse globale est de 40,6% avec 36% de réponses complètes. Le délai médian de réponse de 42 jours et la durée médiane de la réponse de 17,6 mois. La médiane de survie globale est de 18 mois avec un taux de survie globale, à 19 mois de suivi, à 100% chez les patients repondeurs, contre environ 20% chez les patients n’ayant pas répondu à l’ivosidenib (p < 0,001) (Figure 1).
La médiane survie sans évènement est de 3,5 mois; la principale cause d’arrêt du traitement était la progression.
L’ivosidenib n’a été arrêté pour cause de toxicité que chez un patient. 3 patients ont présenté une infection fongique. 

 
Discussion 
L’ivosidenib permet d’obtenir des taux de réponse très encourageants, similaire à ceux retrouvés dans l’étude de DiNardo.
N’ayant pris en compte que les patients déclarés par les centres, notre recueil n’est probablement pas suffisamment exhaustif.
De nombreuses questions restent d’actualités, notamment comment sélectionner les patients les plus susceptibles de répondre à l’ivosidenib et la pertinence d’associer l’ivosidenib à d’autres traitements.
 
 
Conclusion 
L’ivosidenib montre des résultats encourageants dans les rechutes de LAM IDH1+ post-allogreffe avec une survie globale prolongée chez les patients répondeurs. Le profil de tolérance était également satisfaisant chez ces patients fragiles.

 
 

Survie globale à partir de la rechute selon le niveau de réponse à l’ivosidenib. Réponse à l’ivosidenib (CR et CRi) (courbe orange). Absence de réponse à l’ivosidenib (courbe verte)

Introduction/Objectif:
La validation des procédés et la formation/habilitation du personnel pour les transformations concernant les moelles osseuses sont difficiles à mettre en œuvre du fait de l’absence de prélèvements médullaires (PM) disponibles qui devraient être consacrés aux manipulations nécessaires, en raison de considérations éthiques et techniques. Dans la mesure où le volume, l’hématocrite et la cellularité sont susceptibles d’impacter la réalisation des transformations et leurs résultats, il est souhaitable de disposer d’un produit cellulaire de substitution facilement disponible et ayant des caractéristiques proches de celles des produits issus d’un PM.
Matériel et méthode:
Des valeurs cibles sont établies pour ces paramètres par la détermination rétrospective des statistiques descriptives des 25 PM (pédiatriques et adultes) reçus en 2020-2021 au laboratoire.
Ces paramètres sont également établis pour des produits de laboratoire, d’enseignement et de recherche (PLER) mis à disposition par l’EFS, à savoir sang total (ST) et plasma frais congelé (PFC) issus de dons rejetés pour non-conformité par le processus transfusionnel , et culots cellulaires (CC) obtenus en tant que déchets lors de la préparation des mélanges de concentrés plaquettaires (MCP) (8 couches leuco-plaquettaires issues de dons de ST prélevés sur kit Top and Bottom de Macopharma°,  et poolées pour préparer les MCP avec le kit TACSI° de chez Terumo°).
Un don de ST, dont le volume et la cellularité sont beaucoup plus faibles que ceux d’un PM moyen, peut difficilement être considéré comme représentatif d’un PM et donc pertinent. De plus, un don de ST non-conforme n’est pas toujours disponible quotidiennement à l’EFS. Des mélanges possibles de PLER susceptibles de se rapprocher théoriquement d’un PM pour tous les paramètres sont donc recherchés par le calcul.
 
Résultats:
Les médianes obtenues pour les PM sont de 1105 ml, 33,5% et 16130 cellules/mm3. On définit qu’un mélange de 3CC, + 2 PFC + 1 ST doit théoriquement se rapprocher le plus de ces valeurs. L’absence dans ce mélange du ST l’en éloigne de manière mineure en donnant un produit avec une cellularité plus élevée et un hématocrite plus faible, mais d’approvisionnement plus certain.
Des mélanges sont préparés à l’aveugle selon ces deux procédures (avec et sans ST) sans déterminer en amont la cellularité des PLER unitaires initiaux. La totalité présente des valeurs très proches des médianes déterminées rétrospectivement sur les PM pour les paramètres considérés.
Les modalités du mélange assurent également la stérilité de ce produit de substitution.

Discussion : Les différences notables entre un PM et ces mélanges concernent la formule leucocytaire et la richesse en cellules souches et progénitrices. Il est toujours possible de rajouter un volume faible d’une source de cellules CD34+ (par exemple poches de cellules souches autologues à détruire) si l’exploration de ces cellules est nécessaire, avec l’aléa lié à la décongélation.
Conclusion:
Les mélanges obtenus selon ces protocoles sont très similaires à un PM et peuvent donc servir à la validation des procédés ou à la formation du personnel. La charge de travail nécessaire à l’obtention de ce mélange est raisonnable et compatible avec l’activité PLER de l’EFS.

Introduction :
After anti-CD19 CAR-T cell therapy for acute lymphoblastic leukemia (ALL), 1.5 year-relapse rates are from 35% to 44% (1,2). Leukemic cell resistance mechanisms leading to tumoral escape after targeted therapy comprise loss of targeted antigen expression (2–6), expression of molecules inhibiting cytotoxic T-lymphocytes effectors (7–9), and loss of co-stimulatory molecules (10,11).
Here we present the case of a 21-year-old patient who presented successive relapses of an intragenic deleted IKAROS and overexpressed CRLF2 B-ALL. This highly treated patient received a chemotherapy combined with rituximab, an hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) and anti-CD19 CAR-T cells therapy (Tisagenlecleucel). All followed by disease recurrences. The patient's clinical history is summarized in Fig 1.
An extended immunophenotype of the B-ALL and sensitivity to anti-CD19 CAR-T cells mediated lysis are analysed. Mechanisms of tumoral escape and potential therapeutic options are discussed.
Method:
Peripheral blood samples were collected at diagnosis (Dg), at the relapse after HSCT (R2) and at the relapse after anti-CD19 CAR-T cells (R3). We also collected residual viable cells in the bag after Tisagenlecleucel infusion. An extended surface immunophenotype of all the 3 ALL were performed by flow cytometry using a “human cell surface marker screening kit” from Biolegend®. Sensitivity to anti-CD19 CAR-T cells-induced lysis was analysed by standard 51Cr cytoxicity assay.
Results:
We first noted a significant decrease of previously targeted CD20 and CD19 antigens expression between Dg and the relapses even if CD19 remained expressed in all the ALL samples. Regarding resistance mechanisms, molecules involved in immunological synapse (class I and II HLA or CD50, CD58, CD74) and co-stimulatory ligands as CD80 (B7.1), CD86 (B7.2) and CD54 (ICAM-1) expression remain stable among successive relapses. Likewise, expression of checkpoint inhibitors as KLRG1, Podoplanin, CD160, CD274, CD366, CD276 and CD223 was very low in all ALL. 
The 51Cr cytoxicity assay revealed that all the three ALL, even R3, were similarly lysed by autologous anti-CD19 CAR-T cells. A second anti-CD19 CAR-T cells injection could therefore have been discussed for this young patient.
Interestingly, immunophenotype analyses revealed that some targetable antigens, which are not routinely tested, appeared among relapses as CD135 (FLT3), CD25, BAFF-R providing other therapeutic options.
In addition, seven days after the CAR T-cells injection, blood immunophenotype revealed the appearance of monocytic cells CD14+, HLA-DR neg, CD33+, CD11b high. These monocytic myeloid derived cells CD14+/HLA-DRlo/neg were recently described as tumor-induced immunosuppression mediators and associated with poorer anti-CD19 CAR-T expansion during manufacturing from samples of children with ALL (12,13).  Fig.2 summarize all these results.
Conclusion:
For this patient, we did not show any appearance of resistance to anti-CD19 CAR T-cells mediated lysis. Immunophenotyping analyses revealed new targetable antigens, which could have led to unexpected therapeutic options. Moreover, microenvironment should also be considered in the immunotherapy setting as the CD14+/HLA-DRlo/neg monocytes which could have, here, impaired CAR-T efficacy.

Fig 1: Patient medical history and samples collected

Fig 2: A: Immunophenotyping results for the 3 ALL: at diagnosis (Dg), post-HSCT relapse (R2) and post-CAR-T relapse (R3). Immunophenotype of a B-EBV induced cell line was presented as control. B: 51Cr cytotoxic assays over 4h. Analyse of sensitivity of AL

Bibliographie
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Introduction / Objectif : Les propriétés d’immunomodulation des cellules stromales mésenchymateuses issues de cordon ombilical (CSM-CO) humain offrent une perspective thérapeutique dans le traitement des maladies à composante immunitaire et/ou inflammatoire. Cependant, la variabilité des résultats cliniques demeure un vrai challenge. Notre équipe a développé un médicament de thérapie innovante expérimental composé de CSM-CO issues d’un donneur unique, autorisé pour un usage clinique. L’objectif de ce travail a été d’évaluer l’hétérogénéité inter-donneurs des propriétés immunomodulatrices des CSM-CO, puis de les comparer aux propriétés des CSM-CO d’un pool de plusieurs donneurs. 

Matériel & Méthode : Les CSM-CO ont été isolés à partir de 10 cordons ombilicaux. Le pool de CSM-CO a été constitué à partir de 3 cordons. Nous avons évalué leurs phénotypes mésenchymateux et immunogène ainsi que leurs fonctions immunomodulatrices par l’expression de l’indoleamine 2,3-dioxygenase (IDO) et des marqueurs d’activation (ICAM, VCAM et PD-L1) par cytométrie en flux. Leurs propriétés biologiques ont été caractérisées à l’état basal et après traitement par l’interferon γ (IFNγ) 10ng/ml seul ou associé au Tumor Necrosis Factor α (TNFα) 10ng/ml pendant 48h afin de mimer l’environnement inflammatoire. Les résultats sont exprimés en moyenne ± écart-type.

Résultats : L’expression de l’IDO est induite après traitement inflammatoire mais a présenté une forte hétérogénéité entre les 10 donneurs: de 9.3 à 80.7% après IFNγ et de 13.0 à 84.4% après IFNγ+TNFα. Ceci a permis de distinguer 3 profils de réponse: high, medium, low. Nous avons évalué les CSM issues d’un cordon de chaque profil puis celles d’un pool de ces 3 cordons. Les CSM de chaque donneur ainsi que du pool ont exprimé positivement les marqueurs CD90, CD105, CD73, CD44, CD29 mais pas les marqueurs CD14, CD45, CD31 à l’état basal ni après traitement inflammatoire. Une variabilité d’expression du HLA-DR et du CD86 est observée entre les 3 donneurs. De façon intéressante, cette expression n’est pas augmentée dans le pool. L’expression de l’IDO est induite après traitement par IFNγ et IFNγ+TNFα et est signficativement supérieure pour le donneur high (78.5±11.9% et 83.5±9.0%) comparé au medium (18.5±13.4%; p<0.0001 et 39.8±26.4%; p<0.001) et low (9.3±7.3%; p<0.0001 et 13.0±9.7%; p<0.0001). L’expression de l’IDO dans le pool est similaire à la moyenne de son expression par les 3 donneurs individuels (NT: 1.0 ± 1.1% vs 1.4 ± 1.1%; IFNγ : 36.3 ± 36.7% vs 33.1 ± 0.9%; IFNγ+TNFα : 45.4 ± 35.6 vs 49.8 ± 4.9%). L’expression des marqueurs ICAM, VCAM et PD-L1 a présenté une variabilité entre les cordons mais n’a pas permis d’isoler les 3 profils. Le pool cellulaire a montré une tendance vers une diminution de cette hétérogénéité. 

Discussion/Conclusion : Nos résultats ont montré l’existence d’une hétérogénéité inter-donneurs des propriétés immunomodulatrices des CSM-CO avec la distinction de 3 profils de réponse: high, medium et low. La constitution d’un pool de CSM issues de plusieurs donneurs pourrait réduire cette variabilité.

Introduction: A full exploration of immune responses is deserved after anti-SARS-CoV-2 vaccination and boosters, especially in the context of allogeneic hematopoietic stem-cell transplantation (Allo-HSCT). Although several reports indicate successful humoral responses in such patients, the literature is scarce on cellular specific immunity. We recently reported a strong response of specific anti-SARS-CoV-2- CD4+ T-cells, with a IFNγ–/TNFα+ cytokine profile, in 89% of humoral responders and 40% of non-humoral responders (Clemenceau, 2022). In this study, we have evaluated humoral and T-cell responses after one (V3 group n=40) or two (V4 group n=12) BNT162b2 mRNA vaccine boosters in 52 Allo-HSCT patients and in 12 healthy donors.

Methods: Blood samples were collected between January 18th and March 3rd 2022 during the Omicron wave in France. Anti-spike antibodies were tested using anti-SARS-CoV-2 immunoassay Elecsys® (Roche, Rotkreuz, Switzerland). Anti-SARS-CoV-2 Spike and anti-EBV (as positive control) specific CD3+ T-cell responses were evaluated using Human INF? ELIspot (Mabtech, Nacka Strand, Sweden) and intracellular cytokine staining after peptide stimulation (PepTivator Prot_S Complete, Miltenyi Biotec, Bergisch Gladbach, Germany).

Results:  
All controls (100%) and 81% of the whole patient cohort have developed a protective anti-S antibody level (>250 BAU/mL) after the boost vaccinations. The rate of subject reaching the highest antibody concentration (>2500 BAU/mL) was significantly higher in controls than the whole patient cohort (100% vs 52%, p=0.005) (Table 1).
After the booster vaccination, 85% of patients and 100% of controls developed a specific-T cell response. Median frequency of anti-Spike T-cells was significantly lower for V3 patients than in controls but not significantly different between V4 patients and V3 controls (Table 1 and Figure 1.A). We did not find a significant difference in the anti-SARS-CoV-2 T-cell frequency between patients whose analysis was done before 6 months after the last vaccination or those for whom the analysis was done after 6 months (Figure 1B). For 14 individuals with the highest frequencies of anti-Spike CD3+ T cells (? 0.180 SFU/100 CD3+ T-cells), a predominance of anti-spike CD4+ T-cell response was observed and, interestingly, a polyfunctional cytokine profile was observed in both controls (n=3), and patients (Figure 1 C and D). Importantly, considering the patients with no antibody response (n=5) or not reaching a protective antibody level after boosts (n=5), 8/10 (80%) had a measurable T-cell response.
At time of last follow-up (June 1st 2022), two V3 patients have presented a non-severe COVID 19 infections (one with a negative serology and 0.039 SFU/100 CD3+ T-cells and the second with a serology >2500 BAU/mL and 0.040 SFU/100 CD3+ T-cells). One V3 patient with negative serology and 0.367 SFU/100 CD3+ T-cells at time of analysis have died of COVID-19 infection.

Conclusion: In this cohort after one or two booster vaccination, 81% of patient achieved a protective humoral response while 85% achieved a T-cell response. The median frequency of anti-Spike T-cells did not differ either between controls and the whole cohort of patients. COVID-19 infections were solely observed in individuals having received only one booster. These results indicate that four vaccine injections help to achieve a satisfactory level of both humoral and cellular immune protection in Allo-HSCT patients.
 

Les médicaments CAR-T révolutionnent les stratégies thérapeutiques pour les lymphomes agressifs récidivants ou réfractaires. Yescarta et Kymriah sont indiqués pour le traitement du lymphome diffus à grandes cellules B en rechute/réfractaire après minimum 2 lignes de traitement. Yescarta et Tecartus sont autorisés pour les traitements du lymphome médiastinal primitif à grandes cellules B et du lymphome à cellules du manteau. Les mécanismes d'efficacité et de résistance des CAR-T restent à explorer afin d'optimiser les stratégies de mise en place de ces thérapies. Il est essentiel de disposer d’une collection d’échantillons biologiques parfaitement annotés provenant de patients traités avec des cellules CAR-T, dans le cadre de l’AMM ou l’ATU. Ce matériel, associé à des données épidémiologiques, cliniques et biologiques, permettra l’élaboration de programmes de recherche ambitieux et cohérents avec l’état de l’art, pour optimiser des stratégies post-CAR-T.
Depuis 2020, l'Institut Carnot CALYM et le réseau CRYOSTEM collaborent à la mise en place de CeVi_CAR-T, première collection française harmonisée de patients atteints de lymphomes traités par cellules CAR-T. La collecte de ganglions lymphatiques et de sang périphérique est déployée sur 6 sites, réunissant des services d'hématologie et des centres de ressources biologiques, certifiés NFS96-900 pour le traitement et stockage d’échantillons. La coordination du réseau bénéficie de la certification ISO9001 de CALYM et de CRYOSTEM. Les données cliniques associées sont issues du registre LYSARC DESCAR-T et liées à l’identifiant patient du registre EBMT ProMISe mis à jour par les centres membres de la SFGM-TC.
Au 1er septembre 2022, 181 patients ont été inclus, correspondant au prélèvement de 928 échantillons de sang, dérivés en 4701 aliquots de plasma et en 1748 aliquots de cellules viables en DMSO. Les critères d'inclusion sont révisés de manière dynamique en fonction des autorisations en cours pour les thérapies CAR-T dans les hôpitaux français. Au total, 140 patients à lymphomes diffus à grandes cellules B, 31 à lymphomes à cellules du manteau et 6 à lymphomes folliculaires ont été inclus. De plus, pour 28 patients de la collection CeVi_CAR-T, un appariement a été réalisé entre les prélèvements de sang, de moelle osseuse et de ganglions lymphatiques, dérivés en aliquots de cellules viables. Un premier projet utilisant des échantillons de plasma a mis en évidence une qualité appropriée pour les analyses métaboliques et a conforté une synergie entre les registres CeVi et DESCAR-T.
Dans les lymphomes, le ganglion est le siège d’une importante activité antitumorale et de résistance aux CAR-T. Il s’agit d’échantillons clés, difficiles à collecter. Si la requalification biologique d’échantillons sanguins est réalisable en routine, l’enjeu de la collection réside dans l’appariement avec un échantillon de ganglion. Des approches type CryoStor® permettent l’inclusion efficiente de microbiopsies pour poursuivre les efforts de collecte de matériel tumoral. L’inclusion d’échantillons de selles et d’urine, d’intérêt dans le contexte des CAR-T, est envisagée.
Avec la création de la première collection centrée sur les patients atteints de lymphomes traités par cellules CAR-T, la collaboration CALYM-CRYOSTEM ouvre des perspectives de recherche en donnant accès à une matière première de qualité. Les recherches menées permettront de consolider les connaissances sur cette approche thérapeutique cellulaire récente.

Organisation des prélèvements de la collection CeVi_CAR-T

Réseau de la Collection CeVi_CAR-T

Cinétique des prélèvements sanguins Collection CeVi_CAR-T

Taux de patients prélevés dans le cadre de la Colelction CeVi_CAR-T selon la période

Introduction : La conservation des cellules hématopoïétiques est critique pour la réussite de la greffe. Récemment, nous avons montré que le pré-conditionnement des cellules primitives hématopoïétiques CD34+ en atmosphère hypoxique/hypercapnique en hypothermie modérée (30°C) activent les mécanismes protecteurs permettant une survie prolongée lors de leur stockage en hypothermie sévère (4°C) et lors de leur réchauffement à une température physiologique. Cette approche a induit l’état d’hypométabolisme régulé similaire à l’hibernation. Notre travail actuel
est dédié à la conception d’un milieu optimal pour la conservation des cellules CD34+ et plus particulièrement à l’examen d’un agent pharmacologique, le sulfure d’hydrogène (H2S) dont les données récentes mettent en avant les effets cytoprotecteurs contre le stress hypothermique.
 L’objectif de cette étude est de tester l’hypothèse que le H2S supplémenté dans le milieu de conservation puisse induire l’état d’hypométabolisme des cellules hématopoïétiques CD34+ et activer les mécanismes protecteurs contre le choc hypothermique lors de leur réchauffement à température physiologique (37°C).
Méthodes : Pour ce faire, des cellules de sang placentaire CD34+ (cellules souches et progénitrices hématopoïétiques) sont isolées par tri immuno-magnétique puis pré-conditionnées dans des atmosphères hypoxiques/hypercapniques (HH) ou air ambiant en hypothermie modérée (30°C). Puis les cellules sont conservées en hypothermie sévère (4°C) pendant 7 jours. Enfin, les cellules sont réchauffées à 37°C pour stimuler un réveil métabolique chez ces dernières, durant lequel leur viabilité et fonctionnalité sont étudiées.
Résultats : Au cours de ce projet, nous avons testé l’action de deux donneurs de H2S, dont les cibles sont différentes, l’AP39 et le GYY4137. Nos résultats montrent que l’ajout du H2S lors du préconditionnement des cellules en air ambiant associé à une hypothermie modérée (30°C) permet de prolonger la survie des cellules conservées en hypothermie sévère (4°C) pendant 7 jours. De plus, la présence du H2S pendant  le réveil physiologique (37°C) diminue l’apoptose cellulaire, indiquant son implication dans les mécanismes qui protègent  les cellules contre les dégâts provoqués par l’hypothermie sévère. Cependant, cet effet était plus remarquable pour les cellules préconditionnées en HH qu’en air ambiant. En outre, l’étude du profil bioénergétique grâce à la technologie Seahorse nous a permis de mesurer les changements dans la respiration cellulaire. En effet, dans notre modèle, la présence du H2S a permis une amélioration des paramètres de la respiration ainsi qu’une orientation des cellules CD34+ vers le métabolisme des lipides, via l’oxydation des acides gras, en tant que substrat énergétique principal.
Conclusion : Ces résultats ouvrent une piste prometteuse pour la conception de milieux permettant la conservation prolongée de la viabilité des greffons en attente de transplantation pendant leur stockage et transport en hypothermie sévère (conservation liquide).

 

Introduction. La greffe de cellules souches hématopoïétiques (GCSH) allogéniques est un traitement curatif pour divers troubles hématologiques malins et non malins. La quantification du chimérisme est importante dans la phase de prise de greffe mais aussi dans le cadre du suivi de la maladie résiduelle. Aujourd’hui, la quantification du chimérisme se réalise soit par l’analyse de taille des microsatellites (STR) par séquenceur ou soit par la quantification de marqueurs polymorphiques par PCR quantitative en temps réel (qPCR). Cependant, leur utilisation est principalement limitée par leur gamme d’analyse (STR : 80% - 30%, qPCR : 30%-0,1%). De nouvelles techniques innovantes ont révolutionné la quantification du chimérisme, il s’agit d’une part de la digital PCR, représentée par les systèmes de droplet digital PCR (ddPCR Biorad® ou Stilla®) et par les systèmes de cdPCR (chamber digital PCR de Qiagen® et Thermofisher®) et d’autre part par la NGS avec des panels commerciaux (CareDX®, GenDX® et Devyser®).
Notre équipe a déjà comparé les performances de la STR, de la PCR quantitative, de la ddPCR (Biorad® et Crystal digital PCR, Stilla®) et du NGS (Devyser®) dans l'analyse du chimérisme (1). Cette nouvelle étude vise à comparer les dernières avancées technologiques quant à leur capacité à réaliser la quantification du chimérisme après greffe de cellules souches hématopoïétique.
Matériel et Méthode. Des échantillons chimériques artificiels ont été préparés à des chimérismes de 50%, 10%, 1%, 0,5% et 0,1%. 12 échantillons de contrôle qualité externe (CQE) du programme SFHI ont été testés. Enfin, 38 échantillons provenant de 5 patients allogreffés ont été inclus dans cette étude (Lyon, Rennes, Marseille). Le chimérisme de chaque échantillon avait été préalablement quantifié par les techniques du marché public national de l'EFS : qPCR QTrace (JETA® Molecular) et ddPCR (Bio-Rad®). Les tests ont consisté à déterminer les performances analytiques et à comparer les nouvelles techniques de cdPCR QuantStudio Absolute Q et QIAcuity ainsi que les nouveaux panels de NGS AlloSeq HCT (CareDx®) et NGStrack (GenDX®). Enfin, les protocoles techniques, les solutions d’interprétation et les logiciels ont été comparé dans un tableau.
Résultats - Nous montrons que les nouvelles technologies de quantification de cdPCR et de NGS du chimérisme possèdent des performances analytiques satisfaisantes en permettant une quantification précise du chimérisme à partir de n’importe quelle source cellulaire. Les gammes de mesure sont cohérentes avec la pratique, la répétabilité, reproductibilité et l’exactitude retrouvées en font des techniques de choix pour les laboratoires de biologie médicale. Quand certaines solutions sont adaptées à l’urgence, d’autres sont d’avantage appropriées à des expériences en séries et certaines solutions sont automatisées quand d’autres sont plus adaptables.
Conclusions/discussions. En comparant les différentes solutions techniques et logicielles actuelles, cette étude permet d’une part, de faire une mise à jour sur les différentes technologies innovantes de quantification du chimérisme et d’autre part, à chaque équipe de choisir la solution la plus adaptée à son activité actuelle et à ses perspectives (biopsies liquides, séquençage « exome » …).
Bibliographie
1. Pedini P, Cherouat N, Basire A, Simon S, Budon L, Pourtein M, et al. Evaluation of Next-Generation Sequencing and Crystal Digital PCR for Chimerism Monitoring of Post-Allogeneic Hematopoietic Stem Cell Transplantation. Biology of Blood and Marrow Transplantation. sept 2020;S1083879120306170.

Figure 1: MaaT033 induces an increase of microbiota richness with engraftment of OTUs that correlates with immune parameters. A- Engraftment of MaaT033 in each cohort, at V2, V3 and V4. Engraftment is defined as the ratio of OTUs that were not present in

Fig 1B- Principal Component Analysis performed with the host parameters dataset. Individual samples are represented by points, colored and linked according to the corresponding visit. The arrows depict the variables, here the host parameters. The longer t

Les recueils de cellules souches hématopoïétiques peuvent être réalisés avec différents séparateurs. Chaque séparateur présente des avantages spécifiques. Le choix d’utilisation de ce dernier repose sur plusieurs critères, inhérents au service d’aphérèse et au service de thérapie cellulaire.
Sur Toulouse, depuis fin novembre 2020, un séparateur OPTIA a été mis en service, ce qui a conduit à la nécessité d’évaluer les critères sur le choix d’utilisation d’un séparateur plutôt que l’autre. Ainsi, deux séparateurs ont été comparés, la Spectra Optia et la COMTEC, tous deux présents sur le site.
Une étude rétrospective a été mise en place entre le 1er Janvier 2021 et le 1er septembre 2022, sur Toulouse, incluant les recueils de CSH autologues.
Seuls les greffons réalisés à partir d’une seule cytaphérèse ont été inclus.
Après avoir identifié quelques premiers critères et comparé les résultats de recueils de cellules souches autologues, l’objectif est de définir des orientations d’utilisation en tenant compte des impératifs de chaque service.
Les critères considérés étaient liés au patient (le type de don, la morphologie, la psychologie, la numération du jour du recueil), liés au séparateur, et aux techniques de thérapie cellulaire (le rendement de transformation, la qualité du greffon, le rendement de décongélation)
310 prélèvements ont été réalisés sur la période étudiée, et concernaient 195 patients. 67.3% des patients étaient porteurs de myélome, 20.9% de lymphome non hodgkinien, 4.8% des lymphomes de Hodgkin et 6% des maladies autres (tumeurs solides, sclérodermie…)
Les critères en lien avec le service d’aphérèse ont été analysés sur 251 recueils, soit 156 patients. 120 étaient réalisés sur COMTEC et 131 sur OPTIA.
Les critères en lien avec le service d’aphérèse et la thérapie cellulaire ont été analysés sur 74 recueils.
Concernant l’ensemble des recueils, le rendement moyen de recueil est de 52% ±10% pour OPTIA et 55% ±12% pour COMTEC.
Le pourcentage moyen de cellules mononuclées dans le recueil est de 68% ±16% sur COMTEC et de 72% ±15% sur OPTIA. La moyenne de concentration en cellules nucléées était de 234 G/L pour les recueils sur OPTIA, et de 164 G/L sur COMTEC, avec des volumes moyens respectivement de 222mL et 329mL.
Concernant les greffons issus d’une seule cytaphérèse, les moyennes de rendement en CD34 après décongélation étaient de 61% ±14,5% sur COMTEC, et de 72% ±14,5% sur OPTIA, avec des moyennes de viabilité, respectivement, de 62% ±15.6% et 74% ±13.5%. La durée moyenne de sortie d’aplasie était à 11 jours, quelques soient le type de séparateur, le rendement de CD34, et la viabilité à la décongélation.
En fonction de la disponibilité, et des autres recueils prévus le même jour, les critères clinico-biologiques, et les caractéristiques du séparateur doivent être pris en compte dans le choix du séparateur pour la réalisation du recueil.
Des analyses complémentaires sont nécessaires pour compléter cette étude, notamment sur le volet de la thérapie cellulaire, et d’envisager une analyse, sur des mélanges de prélèvements, si le séparateur est identique sur l’ensemble des recueils.
Enfin, des paramètres cliniques post-greffes immédiats pourraient être intégrés afin d’adapter la prise en charge du patient, au patient lui-même.

Contexte : L’allogreffe de cellules souches hématopoïétiques est un traitement de choix dans les leucémies aiguës myéloïdes (LAM) et syndromes myélodysplasiques (SMD). La rechute post-greffe n’est pas rare et associée à un pronostic sombre.  Les études par séquençage de l’exome complet et RNASeq, ont montré un mécanisme d’immunoévasion des blastes dans le microenvironnement médullaire.
 
Matériel et Méthode : Nous avons mené une étude prospective, monocentrique de 2018 à 2021, intéressant des patients allogreffés pour SMD de haut risque et LAM. Les critères d’inclusion étaient : le conditionnement de greffe comprenant fludarabine et busulfan, un donneur HLA-identique, une prophylaxie de la maladie du greffon contre l’hôte (GVH) homogène (Sérum anti-lymphocytaire, ciclosporine et mycophénolate mofétil). L’étude séquentielle de prélèvements médullaires et sanguins à J30, J90 et J180 a permis d’étudier le phénotype et la fonction des lymphocytes T et des cellules myéloïdes.
 
Résultats : Sur 21 patients (n=14 sans rechute, n=7 en rechute), l’analyse des LT objective un profil immunologique associé à la rechute. Au sein des lymphocytes T, on observe une plus grande proportion de lymphocytes TSCM (transitionnal stem cell memory), CD4+ CD8-, CD45RA-, CCR7+, CD95+ (57,36% +/-6,05% vs 18,87% +/- 4,98%. P=0,0022 **) de phénotype épuisé. Aucune différence n’a été observée en terme de proportion de LT régulateurs ou lymphocytes T/NK invariants. Au sein des cellules myéloïdes, certaines cellules HLA-DR-, Lin-, CD11b+, CD33+ sont décrites comme des cellules myéloïdes suppressives (MDSCs). Nous avons observé dans notre cohorte, qu’au cours des 6 premiers mois de la greffe, la proportion de MDSCs au sein des cellules myéloïdes totales diminuent au cours du temps, de façon homogène dans les deux groupes de patients (rechute et sans rechute). Ces cellules, lorsqu’elles sont étudiées en co-culture avec les LT effecteurs, n’ont de propriétés immunosuppressives puissantes, que chez les patients en rechute (97% +/- 0.5% de prolifération des LT vs 27.11% +/-0.09% de prolifération des LT cultivés avec les MDSCs, P=0.0333 *), et ce dès le premier prélèvement (J30) post-greffe. Les MDSCs dans le sang et la moelle osseuse présentent des niveaux de ROS cytosoliques + mitochondriales plus élevés (253.7 +/- 25.59 d’intensité moyenne de fluorescence (IMF) vs 42.64 +/- 22.79. P=0,0286 *) et un inflammasome NLRP3+ activé (26.54% +/- 4.05% de cellules positives vs 6.30% +/- 1.77%. P=0.0011 **), comme décrit précédemment dans le cancer solide, comparativement aux cellules myéloïdes totales. Pour autant, la modulation in vitro du métabolisme et de l’inflammasome des MDSCs ne modifie pas leurs propriétés immunosuppressives.
 
Discussion et conclusion : En accord avec la littérature, les patients en rechute blastique de LAM post-allogreffe, présentent une proportion plus importante de TSCM épuisé . L’émergence de cellules myéloïdes de phénotype « MDSCs » en post-greffe n’est que le reflet d’une hématopoïèse inflammatoire qui diminue dans le temps. En revanche, l’étude de leur propriété immunosuppressive in vitro est corrélée à la rechute. Cette exploration, facilement réalisable dans le sang, est prédictive de la rechute et suggère que moduler ces cellules en traitement de maintenance post-greffe serait une piste intéressante pour prévenir la rechute.

Background
Graft-versus-host disease (GVHD) has remained a serious limitation of allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. IL-15 is a member of the cytokine receptor gamma chain family which stimulates in vitro the proliferation of CD4+ and CD8+ T cells, both naive CD4+ T cells and memory CD8+ T cells. Its impact on GVHD has remained debated. Here, we compared xenogeneic GVHD (xGVHD) in humanized NSG and NSG mice expressing IL-15 (NSG-IL15 mice).
 
Methods
XGVHD was induced by i.v. injection 20x106 human peripheral blood mononuclear cells (hPBMC) in NSG and NSG-IL15 mice on day 0. GVHD severity was assessed by a scoring system that incorporates four clinical parameters: weight loss, posture, mobility and anemia. Each parameter received a score of 0 (minimum) to 2 (maximum). Mice were followed for xGVHD score and survival. In addition, human T-cell engraftment and as well as human T-cell subtypes were monitored in NSG and NSG-IL15 blood on days 14, 21 & 28. This experiment was assessed in 2 independent experiments using hPBMC from 2 different donors.
 
Results
We first compared xGVHD in NSG and NSG-IL15 mice transplanted with 20×106 hPBMCs. Combining data from the 2 experiments, we observed that xGVHD severity (P=0,0050) and lethality (P=0.0151) were higher in NSG-IL15 than in NSG mice. Interestingly, several NSG-IL15 mice experienced diarrhea, which is an uncommon xGVHD sign in the classical NSG xGVHD model. This was associated with higher engraftment of human T cells in NSG-IL15 mice. Looking at T-cell subsets, in comparison to NSG mice, NSG-IL15 mice had higher number of hCD45+ at day 14 and 21, higher number of CD4+ at day 14 and 21, higher number of naive CD4+ T cells at day 14 and 21, higher number of CD8+ at day 14 and 21 and higher number of CD8+ TEMRA at day 14, 21 and 28 in their peripheral blood.
 
Conclusion
In summary, our data indicates that NSG-IL15 mice seems developing more severe xGVHD than NSG mice transplanted with hPBMC.

Les cancers hématologiques sont plus rares que les autres cancers à tumeurs solides et leurs traitements sont particulièrement puissants et lourds. Parmi ceux-ci, la greffe allogénique de moelle osseuse (GAMO) constitue un des traitements les plus efficaces mais son risque de complications peut, selon le parcours thérapeutique, impacter la qualité de vie des patients et particulièrement leur santé physique et mentale. Les conséquences psychosociales de la GAMO sont particulièrement marquées pendant la première année post-greffe. Alors que la plupart expriment des besoins de soutien émotionnel que l’éloignement avec l’hôpital rend difficile à satisfaire, moins de 10% des patients greffés en rémission suivent un soutien psychothérapeutique. Les représentations stigmatisantes que se font les individus d’un tel recours, la crainte d’une surcharge imposée par un suivi additionnel sont parmi les raisons d’évitement. Pour lever les freins et faciliter le recours aux dispositifs d’accompagnement proposés, cela suppose de comprendre les préférences et attentes des patients sur les types des supports interventionnels.
Depuis 2016, nous travaillons à l’élaboration d’un dispositif d’aide non-thérapeutique hors-hospitalier axé sur le renforcement des capacités, aptitudes et comportements d’autonomisation, rapportées comme étant les plus efficaces dans la période d’après-cancer Ce dispositif appelé onco-coaching d’inspiration sportive (programme REBOND) s’inspire des leviers relationnels efficaces mobilisés dans l’accompagnement des athlètes et équipes sportives de haute performance. Leurs principes sont largement documentés dans le champ de la psychologie du sport. La faisabilité d’un programme de 6 séances mensuelles d’onco-coaching intervention a été testée, avec succès, auprès de patients 6 mois post-GAMO. L’acceptabilité par les patients a été validé et a montré qu’une relation de qualité entre un coach et un patient en rémission permet d’amorcer et/ou d’entretenir un processus visant à retrouver un fonctionnement psychosocial optimal (Empowerment) parfois meilleur que celui avant-greffe. Ces résultats sont associés à une hausse de l’espoir plusieurs mois après l’arrêt du coaching. Pour les patients, les aspects sportif et extrahospitalier aident à la mise à distance de la maladie comme particulièrement pertinents pour mettre à distance la maladie. La temporalité du programme (période post traitement) est jugée pertinente car elle assurer une continuité effective entre hospitalisation et la rémission. Une phase d’évaluation de l'efficacité de cette intervention sur la qualité de vie globale auprès de 108 patients 3 mois post-GAMO ainsi que l’évaluation de son coût économique est en cours. Une méthodologie mixte devrait aussi permettre également une meilleure caractérisation du concept d’empowerment encore mal défini pour faciliter son évaluation et en faire un indicateur de transformation sociale. Ce travail résulte d’une co-construction pluridisciplinaire et s’appuie sur un partenariat chercheurs-acteurs qui prévoit l’intégration et la participation active des patients dans l’ensemble des étapes de la recherche.
 
 
Bibliographie

  Mayer DK, Nasso SF, Earp JA. Defining cancer survivors, their needs, and perspectives on survivorship health care in the USA. The Lancet Oncology 2017; 18: e11–e18.
 Recklitis CJ, Syrjala KL. Provision of integrated psychosocial services for cancer survivors post-treatment. Lancet Oncol 2017; 18: e39–e50.
Rosenberg SM, Partridge AH. Looking back, moving forward: the evolution of cancer survivorship care. The Lancet Oncology 2017; 18: 18–19.
   Stanton AL. What Happens Now? Psychosocial Care for Cancer Survivors After Medical Treatment Completion. JCO 2012; 30: 1215–1220.
Calvin S, Blaise D, Ben Soussan P, Cuvelier S, Cicut N, Caymaris L et al. Le coaching sportif pour un rétablissement psychologique et social : une perspective innovante. Bulletin du Cancer 2017; 104: 823–830.
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